Strukturelle und biochemische Charakterisierung der Transkriptionsfaktoren mCLOCK, mBMAL1 und NPAS2 der Säugetier-Uhr

最大的生命周期是时间周期活动，因此是一种非周期性的节奏，它通过内部的时间序列和24小时的环境同步韦尔登的时间序列来实现。24小时内，通过蛋白质-蛋白质-和蛋白质-DNA-相互作用、蛋白质-DNA-后修饰，使蛋白质定位、表达和表达发生变化，从而产生24小时内的转录和翻译节律。Um ein detailliertes Verständnis der transskriptionsregulation der Säugetier-Uhr zu gewinnen，sollen Röntgenstrukturen der bHLH-PAS-transskriptionsfaktoren mCLOCK，mBMAL1 and NPAS2 der Maus sowie von deren Komplexen mit den Cryptochromen，PERIOD 2 and dem transskripriptionsrepressor CIPC bestimmt韦尔登.通过生物化学和生物物理学的联合方法研究了蛋白质-蛋白质-和蛋白质-DNA的相互作用。凝胶过滤、分析超滤、等温滴定、Oberflächenplamonresonanz、Pull-Downs、CD-光谱分析、偏振分析、带移分析。

Die meisten Lebewesen besitzen tagesperiodische Aktivitätszyklen, so genannte zirkadiane Rhythmen, welche durch innere Uhren erzeugt und mit dem 24h Tag-Nacht-Zyklus der Umwelt synchronisiert werden. Dem 24h Rhythmus liegen Rückkopplungsschleifen der Transkription und Translation zugrunde, deren 24h Periode durch spezifische Protein-Protein- und Protein-DNA-Interaktionen, posttranslationale Modifikationen sowie zelluläre Lokalisation, Expression und Abbau von Uhrenproteinen erzeugt wird. Um ein detailliertes Verständnis der Transkriptionsregulation der Säugetier-Uhr zu gewinnen, sollen Röntgenstrukturen der bHLH-PAS-Transkriptionsfaktoren mCLOCK, mBMAL1 und NPAS2 der Maus sowie von deren Komplexen mit den Cryptochromen, PERIOD2 und dem Transkriptionsrepressor CIPC bestimmt werden. Außerdem sollen Protein-Protein- und Protein-DNA Interaktionen durch eine Kombination biochemischer und biophysikalischer Methoden (z.B. Gelfiltration, analytische Ultrazentrifugation, Isothermische Titrationskalorimetrie, Oberflächenplamonresonanz, Pull-Downs, CD-Spektroskopie, Fluoreszenz-Polarisation, Bandshift Assays) analysiert werden.