Strukturelle und biochemische Charakterisierung der Transkriptionsfaktoren mCLOCK, mBMAL1 und NPAS2 der Säugetier-Uhr

哺乳动物时钟转录因子 mCLOCK、mBMAL1 和 NPAS2 的结构和生化特征

• 批准号: 67747387
• 负责人: Professorin Dr. Eva Wolf
• 金额: --
• 依托单位: Arbeitsgruppe Strukturelle Chronobiologie
• 依托单位国家: 德国
• 项目类别: Research Grants
• 财政年份: 2008
• 资助国家: 德国
• 起止时间: 2007-12-31 至 2011-12-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://gepris.dfg.de/gepris/projekt/67747387?language=en
• 关键词: Strukturelle; und; biochemische; Charakterisierung; der

Die meisten Lebewesen besitzen tagesperiodische Aktivitätszyklen, so genannte zirkadiane Rhythmen, welche durch innere Uhren erzeugt und mit dem 24h Tag-Nacht-Zyklus der Umwelt synchronisiert werden. Dem 24h Rhythmus liegen Rückkopplungsschleifen der Transkription und Translation zugrunde, deren 24h Periode durch spezifische Protein-Protein- und Protein-DNA-Interaktionen, posttranslationale Modifikationen sowie zelluläre Lokalisation, Expression und Abbau von Uhrenproteinen erzeugt wird. Um ein detailliertes Verständnis der Transkriptionsregulation der Säugetier-Uhr zu gewinnen, sollen Röntgenstrukturen der bHLH-PAS-Transkriptionsfaktoren mCLOCK, mBMAL1 und NPAS2 der Maus sowie von deren Komplexen mit den Cryptochromen, PERIOD2 und dem Transkriptionsrepressor CIPC bestimmt werden. Außerdem sollen Protein-Protein- und Protein-DNA Interaktionen durch eine Kombination biochemischer und biophysikalischer Methoden (z.B. Gelfiltration, analytische Ultrazentrifugation, Isothermische Titrationskalorimetrie, Oberflächenplamonresonanz, Pull-Downs, CD-Spektroskopie, Fluoreszenz-Polarisation, Bandshift Assays) analysiert werden.

最大的生命周期是时间周期活动，因此是一种非周期性的节奏，它通过内部的时间序列和24小时的环境同步韦尔登的时间序列来实现。24小时内，通过蛋白质-蛋白质-和蛋白质-DNA-相互作用、蛋白质-DNA-后修饰，使蛋白质定位、表达和表达发生变化，从而产生24小时内的转录和翻译节律。Um ein detailliertes Verständnis der transskriptionsregulation der Säugetier-Uhr zu gewinnen，sollen Röntgenstrukturen der bHLH-PAS-transskriptionsfaktoren mCLOCK，mBMAL1 and NPAS2 der Maus sowie von deren Komplexen mit den Cryptochromen，PERIOD 2 and dem transskripriptionsrepressor CIPC bestimmt韦尔登. Außerdem sollen蛋白质-蛋白质-和蛋白质-DNA相互作用通过联合生物化学和生物物理方法（z.B.凝胶过滤、分析超滤、等温滴定、Oberflächenplamonresonanz、Pull-Downs、CD-光谱分析、偏振分析、带移分析。