「脂質抗原」を標的とした新しいアレルギー応答の実証とその病態解明

展示针对“脂质抗原”的新过敏反应并阐明其病理学

• 批准号: 12J04754
• 负责人: 服部 祐季
• 金额: $ 1.73万
• 依托单位: Kyoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2012
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2012-04-01 至 2015-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-12J04754/
• 关键词: GroMM; 結核菌; Mincle; CD1A; TDM; CD1a

結核菌の細胞壁に存在するグリセロールモノミコール酸（Glycerol Monomycolate; GroMM）は、感染の長期化に伴って特異的に産生が誘導される脂質であることがこれまでの報告において示唆されている（Layre E, et al., Chem Biol., 2009）。昨年度に引き続き、本年度もGroMMの生物活性の検証と、その生理学的意義の理解に向けて研究を展開した。GroMMの自然免疫受容体の同定を進め、その受容体がC型レクチンの一種であるMacrophage inducible C-type lectin（Mincle）であること、そして、マウスとヒトではその認識能が異なり、ヒトMincleはGroMMを認識できるのに対し、マウスMincleは全く認識できないことを明らかにした。ヒトおよびマウスMincleの細胞外ドメインを相互に置換したキメラ分子ならびに部位特異的変異導入の実験から、ヒトMincleの細胞外ドメインに存在するGroMMの認識に重要な二か所のアミノ酸配列（ヒトMincleの174-176番目、195-196番目の配列）を同定した。また、作製したヒトMincle Tgマウスの骨髄由来マクロファージはGroMMに対して応答性を示したとともに、皮膚にGroMMリポソームを接種すると好酸球浸潤が誘起され、ヒトMincleがGroMMの自然免疫受容体であることを支持するデータを得た。さらに、ヒト末梢血単核球由来マクロファージもGroMMに応答してTNF-αを産生するが、このTNF-αの産生が自身で作製した抗ヒトMincle抗体によって中和されることを示し、プライマリーな細胞においても、GroMM に対する応答はヒト Mincle 依存的であることを実証した。 この成果は、本年度に入り論文に発表した（Hattori Y, et al., J Biol Chem., 2014）。モルモットにおいて、皮膚にGroMMリポソームを接種すると、ヒトMincleトランスジェニックマウスと同様に好酸球浸潤が認められたことから、新たにモルモットMincleの機能やGroMMに対する生体応答の解明に向けた研究にも着手した。

The cell wall of Mycobacterium tuberculosis is characterized by the presence of Glycerol monoglycolate (GroMM), and the persistence of infection accompanied by specific lipid induction (Layre E, et al., Chem Biol., 2009）。This year, we have been conducting research on the biological activity and physiological significance of GroMM. The identity of GroMM's natural immune receptor has been improved, and the receptor has been identified as a Macrophage inducible C-type lectin (Mincle). It is important to understand the existence of Mincle's extracellular components and the sequence of Mincle's extracellular components (see paragraphs 174-176 and 195-196). Mincle Tg is a natural immune receptor that supports the immune response of GroMM. The origin of TNF-α production in peripheral blood cells, the production of TNF-α by itself, the neutralization of anti-Mincle antibodies, and the identification of Mincle-dependent TNF-α production by GroMM are demonstrated. The results of this study were published in this paper (Hattori Y, et al., J Biol Chem., 2014）。The function of Mincle and the solution of GroMM in vivo were studied.

项目成果

Th1-skewed tissue responses to a mycolyl glycolipid in mycobacteria-infected rhesus macaques.

在分枝杆菌感染的恒河猴中，Th1 组织对分枝杆菌糖脂的反应偏向。

• DOI: 10.1016/j.bbrc.2013.10.021
• 发表时间: 2013
• 期刊: Biochem Biophys Res Commun.
• 作者: Morita D;Miyamoto A;Hattori Y;Komori T;Nakamura T;lgarashi T;Harashima H;Sugita M
• 通讯作者: Sugita M

Differential recognition of glycerol monomycolate, a chronic tuberculosis-associated mycobacterial lipid, by human and mouse Mincle

人类和小鼠 Mincle 对甘油单菌酸酯（一种慢性结核病相关分枝杆菌脂质）的差异识别

• 发表时间: 2014
• 作者: 森田大輔;服部祐季;杉田昌彦;Chihiro Himuro and Takahisa Miyatake;Hattori Y
• 通讯作者: Hattori Y