生体時計に制御される新型アルドステロン酵素を標的とした新しい機序の降圧薬の開発

开发一种针对生物钟控制的新型醛固酮酶的新机制抗高血压药物

• 批准号: 12J05447
• 负责人: 太田 拓巳
• 金额: $ 1.92万
• 依托单位: Kyoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2012
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2012-04-01 至 2015-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-12J05447/
• 关键词: アルドステロン; アンギオテンシンII; 3β-HSD; 副腎球状層; 時計遺伝子

原発性アルドステロン症は内分泌性高血圧の中で最も頻度の高い病因であるが、その発症に関わる遺伝子の多くが不明なままである。特に、非腫瘍性の特発性アルドステロン症は未だに有効な根本治療法が確立されていない難治性疾患である。特発性アルドステロン症の疾患部、及び特発性アルドステロン症様の病態を示すモデルマウスでは、アルドステロン産生細胞である球状層細胞に特異的に発現する3β-HSD（3β水酸化ステロイド脱水素酵素）が過剰に発現しており、この酵素の過剰発現が副腎からの過剰なアルドステロン産生の原因であると考えられる（Doi et al., J Clin Endocrinol Metab., 2014、Doi et al., Nature Med., 2010）。しかしながら、この球状層特異的3β-HSDの発現制御機構については、その多くが未解明なままであった。申請者は、この酵素の発現制御機構の解明が特発性アルドステロン症の発症機構の解明、及び根本治療薬の開発につながると考えた。そこで申請者は、生体内でアルドステロン産生を亢進させる主要な因子であるアンギオテンシンIIに着目し、アンギオテンシンIIが本酵素の発現を誘導するのか、もし誘導されるのであればどのような分子機構を介するのかを調査した。マウスへのアンギオテンシンIIの投与や、ヒト副腎皮質由来のH295R細胞を用いた実験から、アンギオテンシンIIが本酵素の発現を一過性に亢進することを発見した。H295R細胞を用いたプロモーターアッセイやゲルシフトアッセイ、クロマチン免疫沈降により、核内受容体であるNGFIBが本酵素の発現に関与することを発見した。さらに、siRNAを用いたノックダウンやNGFIBのドミナントネガティブ体を用いた実験から、アンギオテンシンIIによる本酵素の誘導は、NGFIBを介して行われていることを示した。

Original 発 sex ア ル ド ス テ ロ ン disease within は secretory high blood 圧 の で も most in the high frequency の い causes で あ る が, そ の 発 disease に masato わ る heritage 伝 son の く more unknown が な ま ま で あ る. Special に, not swollen sores の te 発 ア ル ド ス テ ロ ン disease は not だ に have sharper な が establish fundamental therapy さ れ て い な い intractable diseases で あ る. , 発 sex ア ル ド ス テ ロ ン disease の disorders, and び 発 sex ア ル ド ス テ ロ ン disease others の pathological を shown す モ デ ル マ ウ ス で は, ア ル ド ス テ ロ ン cells で あ る spherical layer of cells に specific に 発 now す る 3 beta HSD (3 beta water acidification ス テ ロ イ ド dehydrated vegetable enzyme) が through turning に 発 now し て お り, こ の enzyme の through turning 発 now が adrenal か The causes of ら <s:1> なア なア ドステロ ドステロ ドステロ ドステロ であると study えられる (Doi et al., J Clin Endocrinol Metab., 2014, Doi et al., Nature Med., 2010). し か し な が ら, こ の spherical layer specific 3 beta HSD の 発 system now royal institution に つ い て は, そ の more く が not interpret な ま ま で あ っ た. Applicants は, こ の enzyme の 発 system royal institution の now interpret が 発 sex especially ア ル ド ス テ ロ ン disease の 発 disease の uttered, and fundamental treatment 薬 び の open 発 に つ な が る と exam え た. は そ こ で applicants, in vivo で ア ル ド ス テ ロ ン produce を hyperthyroidism さ せ る な main factor で あ る ア ン ギ オ テ ン シ ン II に mesh し, ア ン ギ オ テ ン シ ン II が this enzyme の 発 now を induced す る の か, も し induced さ れ る の で あ れ ば ど の よ う な molecular institutions を interface す る の か を survey し た. マ ウ ス へ の ア ン ギ オ テ ン シ ン II の cast with や, ヒ ト adrenal cortex origin の H295R cells を using い た be 験 か ら, ア ン ギ オ テ ン シ ン II が this enzyme の 発 now を transient に hyperthyroidism す る こ と を 発 see し た. H295R cells を using い た プ ロ モ ー タ ー ア ッ セ イ や ゲ ル シ フ ト ア ッ セ イ, ク ロ マ チ ン immune sink に よ り, within the nuclear capacity body で あ る NGFIB が this enzyme の 発 now に masato and す る こ と を 発 see し た. さ ら に, siRNA を with い た ノ ッ ク ダ ウ ン や NGFIB の ド ミ ナ ン ト ネ ガ テ ィ を ブ body with い た be 験 か ら, ア ン ギ オ テ ン シ ン II に よ る this enzyme induction は の, NGFIB を interface し て line わ れ て い る こ と を shown し た.

项目成果

The gene encoding the type I 3beta-hydroxysteroid dehydrogenase is acutely induced by Angiotensin II through orphan nuclear receptor NGFIB signaling in human adrenocortical H295R cells

血管紧张素 II 通过人肾上腺皮质 H295R 细胞中的孤儿核受体 NGFIB 信号传导强烈诱导编码 I 型 3β-羟基类固醇脱氢酶的基因

• 发表时间: 2014
• 作者: Takumi Ota;Masao Doi;Hitoshi Okamura
• 通讯作者: Hitoshi Okamura

Immunolocalization of murine type VI 3β-hydroxysteroid dehydrogenase in the adrenal gland, testis, skin, and placenta

小鼠 VI 型 3β-羟基类固醇脱氢酶在肾上腺、睾丸、皮肤和胎盘中的免疫定位

• DOI: 10.1016/j.mce.2013.09.014
• 发表时间: 2014
• 期刊: Molecular and Cellular Endocrinology
• 影响因子: 4.1
• 作者: Koki Yamamura;Magao Doi;Hida Hayashi;Takumi Ota;Iori Murai;Yunhong Hotta;Rie Komatsu;Hitoshi Okamura
• 通讯作者: Hitoshi Okamura

Angiotensin II triggers transcription of the adrenal gland zona glomerulosa-specific 3β-HSD isoenzyme through de novo synthetic NGFIB pathway

血管紧张素 II 通过从头合成 NGFIB 途径触发肾上腺球状带特异性 3β-HSD 同工酶的转录

• 发表时间: 2014
• 作者: Takumi Ota;Masao Doi;Hitoshi Okamura
• 通讯作者: Hitoshi Okamura

Adrenal Zona Glomerulosa Cells Exhibit Cell-Autonomous Circadlan Oscillations

肾上腺球状带细胞表现出细胞自主昼夜节律振荡

• 发表时间: 2013
• 作者: Takumi Ota;Masao Doi;Hitoshi Okamura
• 通讯作者: Hitoshi Okamura