アルツハイマー病Tauの異常リン酸化に置ける脱リン酸化の役割についての研究

去磷酸化在阿尔茨海默病中Tau蛋白异常磷酸化中的作用研究

• 批准号: 12J06148
• 负责人: 木村 妙子
• 金额: $ 1.15万
• 依托单位: Tokyo Metropolitan University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2012
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2012 至 2013
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-12J06148/
• 关键词: Tau; タウオパチー; phosphorylation; Phos-Tag SDS Page; Cdk5; アルツハイマー病; 前頭側頭葉型認知症; 大脳皮質基底核変性症; Pin1; FTDP-17; dephosphorylation; P25

アルツハイマー病、ピック病などは、細胞内に異常にリン酸化されたTauの蓄積が見られることからタウオパチーと呼ばれている。1999年に家族性の前頭側頭葉型認知症(FTDP-17)でTauの変異が発見され、Tau自体の変異によって、異常リン酸化、蓄積、そして、神経変性が引き起こす事が分かっているが、異常リン酸化が原因か結果かはまだ明らかになっていない。Tauの過剰リン酸化が原因か結果かについては議論の分かれるところであるが、異常リン酸化機構を明らかにする事は、タウオパチーの病理解明に重要である。アルツハイマー病患者脳内では30カ所以上のTauのリン酸化が報告されており、主なリン酸化酵素としてCdk5、GSK3-β、PKAなどが知られている。今までTauの異常リン酸化部位の検出にはリン酸化抗体が用いられてきたが、生体脳内では複数のリン酸化部位が存在する為、多くのリン酸化抗体が必要となりリン酸部位間の定量的な比較は困難な事から本研究ではPhos-Tag SDS-PAGEを用いてTauのリン酸化を解析した。はじめに培養細胞内でのTauのリン酸化を解析した。Tauの主なリン酸化酵素であるCdk5のリン酸化サイトはS202, T205, S235, S404である事が知られていたが、リン酸化箇所を1箇所つぶした1A変異型、1箇所だけ残した3A変異型を作成し解析した所、主なリン酸化サイトがS202, S235, S404である事が分かった。またFTDP-17変異Tau間によるリン酸化を解析した所、TauのC末変異を持つTauのリン酸化状態が野生型に比べ異なる事を明らかにした。続いてタウオパチー患者脳内でのTauのリン酸化解析を行った。アルツハイマー病(AD)、大脳皮質基底核変性症(CBD)患者脳を用いて解析を行った結果、AD, CBD患者脳内で凝集していないTauのリン酸化状態は健常者と同等であり、凝集したTauのみ高リン酸化が引き起こされているという事も明らかにした。これらの結果からPhos-TagはTauのリン酸化を解析する上で有用であり、生体内でのTauのリン酸化を容易に解析できる事から将来バイオマーカーをして使用できる可能性が高いと考えている。

Get sick, get sick, get sick. In 1999, patients with familial dysphagia (FTDP-17), Tau syndrome, Tau autologous syndrome, acidosis, storage, storage, and divine disorder were introduced. The causes of acidification and acidification were not clear. The causes of Tau acidizing were analyzed. Results the etiology of acidizing was analyzed and analyzed. The acidizing machine was responsible for the diagnosis and treatment of the disease, and the pathological diagnosis was important. The reports of Tau acidification, Cdk5, GSK3- β, and PKA were reported by the patients. In recent years, the acidified part of Tau has been detected by Elisa, the complex number of antigens in vivo has been detected, and the acidified site has to be determined. It is necessary to determine the amount of acid in the acidified site. In this study, Phos-Tag SDS-PAGE was used to analyze the amount of acid in the acidified site by Tau. Cell culture, intracellular Tau, acidification, acid analysis. Tau, acidizing enzyme, acidifying enzyme, acidifying enzyme, acidizing enzyme, acidizing enzyme, acidifying enzyme, acidizing enzyme, aci FTDP-17, Tau, acidify, acid, Tau, acid, acid, Please tell me that the patient is suffering from Tau and acidification analysis. Patients with basal ganglia disease (AD) and basal ganglia syndrome (CBD) were analyzed for the results, AD, CBD patients with internal agglutination

项目成果

タウオパチー神経変性疾患におけるTauの異常リン酸化にはPin1依存的な脱リン酸化が関与する.

Pin1 依赖性去磷酸化与 tau 蛋白病神经退行性疾病中 Tau 的异常磷酸化有关。

• 发表时间: 2014
• 作者: T. Wakamura;N. Hasegawa;K. Ohnishi;Y. Niimi and Y. Otani;木村妙子
• 通讯作者: 木村妙子

タウリン酸化のPin1による制御と異常リン酸化のPhos-tagによる解析

Pin1 对 tau 磷酸化的调节以及使用 Phos-tag 分析异常磷酸化

• 发表时间: 2013
• 作者: T. Wakamura;H. Akaike;Y. Omori;S. Takahashi;Y. Niimi;A. Fujimaki;S. Maekawa and Y. Otani;若村太郎，新見康洋，大谷義近;瀧澤誓，大森康智，若村太郎，新見康洋，木俣基，大谷義近;木村妙子
• 通讯作者: 木村妙子