ラットDRGにおけるAVPを介したニューロンーグリア細胞間の相互作用の解明

阐明大鼠 DRG 中 AVP 介导的神经元-胶质细胞相互作用

• 批准号: 12J06480
• 负责人: 守屋 大樹
• 金额: $ 1.73万
• 依托单位: Yamaguchi University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2012
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2012 至 2014
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-12J06480/
• 关键词: TRPV1; SON; AVP; 浸透圧応答; TRPV1_SON; ラット; Capsaicin; 浸透圧受容器; DRG; 浸透圧感知; ELISA; RT-PCR; 細胞内カルシウム濃度; Vasopressin; Satellite glial cells; Schwann cells; S-100; 培養細胞; Vla受容体

昨年度までにラットSONニューロンに発現する浸透圧受容器のうち少なくとも一部は全長TRPV1によって構成されていることを明らかにした。しかし、浸透圧受容器と報告されているホモ4量体のTRPV1では逆転電位の値などいくつか性質が異なることが分かっている。今年度に実施した実験の中でラットSONでエクソンの1-5番目を欠く新しいTRPV1スプライスバリアントを発見し、この分子をTRPV1_SONと名付けた。TRPV1は4量体で一つのチャネルを形成し、他の分子とヘテロ4量体を形成しうること、そしてヘテロ4量体分子はCapsaicinに対する応答が減弱する等ホモ4量体TRPV1が示す性質が変化することが報告されている。我々はラットSONに発現する浸透圧受容器は全長TRPV1とTRPV1_SONのヘテロ4量体で構成されているという仮説を立てた。これを検証するために全長TRPV1、TRPV1_SON、TRPV1とTRPV1_SONを接続した遺伝子をそれぞれ組み込んだベクターを作成し、それぞれのベクターを導入した細胞の浸透圧応答を調べることを検討している。これまで全長TRPV1、TRPV1_SONベクターを作成した。全長TRPV1発現細胞にCapsaicinを適用するとほぼ全ての細胞で応答が見られた。応答が見られた細胞のうち約20%の細胞は高浸透圧刺激にも応答したが、繰り返しの高浸透圧刺激には応答しなかった。TRPV1_SON発現細胞ではcapsaicinおよび高浸透圧刺激に応答しなかった。以上の結果からTRPV1のみ、TRPV1_SONのみを強制発現した細胞ではいずれもラットSONニューロンで見られた性質を再現することが出来なかった。このため、ラットSONニューロンに発現する浸透圧受容器はそれぞれの分子のみで構成されている分子ではないことが考えられた。

Yesterday's annual ま で に ラ ッ ト SON ニ ュ ー ロ ン に 発 now す る soak 圧 by container の う ち less な く と も over a は TRPV1 に よ っ て constitute さ れ て い る こ と を Ming ら か に し た. し か し, soak 圧 container と report さ れ て い る ホ モ 4 quantity body の TRPV1 で は inverse planning on potential の numerical な ど い く つ か nature が different な る こ と が points か っ て い る. In our に be applied し た be 験 の で ラ ッ ト SON で エ ク ソ ン の 1-5 times new mesh を owe く し い TRPV1 ス プ ラ イ ス バ リ ア ン ト を 発 し, こ の molecular を TRPV1_SON と name pay け た. TRPV1 は 4 quantity body で つ の チ ャ ネ ル を form し, he の molecules と ヘ テ ロ を 4 quantity body formation し う る こ と, そ し て ヘ テ ロ 4 quantity body molecular は Capsaicin に す seaborne る 応 a weakened が す る etc ホ モ 4 quantity body TRPV1 が す properties in が variations change す る こ と が report さ れ て い る. I 々 は ラ ッ ト SON に 発 now す る soak 圧 length by container は TRPV1 と TRPV1_SON の ヘ テ ロ 4 quantity body で constitute さ れ て い る と い う 仮 said を て た. こ れ を 検 card す る た め に span TRPV1, TRPV1_SON, TRPV1 と TRPV1_SON を meet 続 し た posthumous son 伝 を そ れ ぞ れ group み 込 ん だ ベ ク タ ー を し, consummate そ れ ぞ れ の ベ ク タ ー を import し の た cells soak 圧 応 answer を adjustable べ る こ と を beg し 検 て い る. The full-length TRPV1 and TRPV1_SONベ タ タ を を を are made as た. Full-length TRPV1-producing cells にCapsaicinを applicable するとほぼ whole て <s:1> cells で応 が answer が see られた. 応 answer が see ら れ た cells の う ち about 20% は high saturate 圧 の cells stimulate に も 応 answer し た が, Qiao り return し の high saturate 圧 stimulus に は 応 answer し な か っ た. TRPV1_SON emergent cells で で capsaicinおよび hyperpermeable pressure stimulation に応 response な った った. の above results か ら TRPV1 の み, TRPV1_SON の み を forced 発 now し た cells で は い ず れ も ラ ッ ト SON ニ ュ ー ロ ン で see ら れ た nature を reappearance す る こ と が out な か っ た. こ の た め, ラ ッ ト SON ニ ュ ー ロ ン に 発 now す る soak 圧 by container は そ れ ぞ れ の molecular の み で constitute さ れ て い る molecular で は な い こ と が exam え ら れ た.

项目成果

RT-PCR and Ca2+ imaging analysis of osmoreceptor molecules in the rat supraoptic nucleus

大鼠视上核渗透压感受器分子的RT-PCR和Ca2+成像分析

• 发表时间: 2014
• 作者: Taiki Moriya;Rina Shibasaki;Tomohiko Kayano;Nami Takebuchi;Momoko Ichimura;Naoki Kitamura;Atsushi Asano;Yoshinao Z. Hosaka;Oksana Forostyak;Govindan Dayanithi;Alexei Verkhratsky;Izumi Shibuya.
• 通讯作者: Izumi Shibuya.

ジムノピリンの背根神経節細胞に対する効果

裸比林对背根神经节细胞的影响

• 发表时间: 2012
• 作者: Izumi Shibuya;Taiki Moriya;Tomohiko Kayano;Naoki Kitamura;Taiki Moriya;Naoki Kitamura
• 通讯作者: Naoki Kitamura

オキシトシンの背根神経節細胞に対する効果に関する研究発表

催产素对背根神经节细胞影响的研究报告

• 发表时间: 2012
• 作者: 守屋大樹;萱野智彦
• 通讯作者: 萱野智彦

ラット視索上核ニューロンに発現するTRPV1の機能解析および浸透圧受容器発現細胞の解析

大鼠视上核神经元TRPV1功能分析及渗透压感受器表达细胞分析

• 发表时间: 2014
• 作者: 守屋大樹;柴崎梨奈;萱野智彦;竹渕奈美;市村桃子;北村直樹;浅野淳;保坂善真;Dayanithi Govindan;澁谷泉
• 通讯作者: 澁谷泉

アルギニンバソプレシンの背根神経節クリア細胞に対する効果に関する研究

精氨酸加压素对背根神经节透明细胞影响的研究

• 发表时间: 2012
• 期刊: Brain Research
• 影响因子: 2.9
• 作者: 守屋大樹;萱野智彦
• 通讯作者: 萱野智彦