Real-time observation of proton-pumping of membrane protein complexes using a novel high-sensitivity IR spectrometer

使用新型高灵敏度红外光谱仪实时观察膜蛋白复合物的质子泵浦

基本信息

项目摘要

This project aims to establish time-resolved IR spectroscopic techniques for observing reactions of membrane protein complexes under physiological conditions in real time. High-sensitivity IR spectrometer was constructed using a femtosecond IR laser as the light source. On the other hand, a flow-flash measurement system was developed to control reactions, which are triggered by the photolysis of caged compounds. Micro-channel flow cell was used to obtain a spectrum with minimal sample consumption. The flow-flash system was installed into time-resolved UV-visible absorption spectrometer and tested on NO reductase. We successfully observed the enzymatic reaction of this membrane protein with microsecond time resolution. Flow-flash time-resolved IR spectroscopy is ongoing.
本计画旨在建立时间分辨红外光谱技术,以真实的时间观察生理条件下膜蛋白复合物的反应。利用飞秒红外激光器作为光源,构建了高灵敏度的红外光谱仪。另一方面,开发了一种流动闪光测量系统来控制反应,该反应由笼状化合物的光解引发。微通道流动池用于以最少的样品消耗获得光谱。将流动闪蒸系统安装在时间分辨紫外-可见吸收光谱仪上,并对NO还原酶进行了测试。我们成功地观察到这种膜蛋白的酶促反应与微秒的时间分辨率。流动闪光时间分辨红外光谱法正在进行中。

项目成果

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タンパク質の低振動コヒーレンス─Revisited─
蛋白质的低振动相干性──重温──
  • DOI:
  • 发表时间:
    2011
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
    Maeda;H.; Terashima;Y.;Masanobu SAGISAKA;久保稔
  • 通讯作者:
    久保稔
酵素反応の観測を可能にする振動分光技術の開発と展望
观察酶反应的振动光谱技术的发展与展望
  • DOI:
  • 发表时间:
    2013
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
    三浦 佳子;西村優里;中村直志;工藤厚太郎,吉澤篤,鷺坂将伸;久保稔
  • 通讯作者:
    久保稔
Copper(I)-dioxygen reactivity in a sterically demanding tripodal tetradentate tren ligand. Formation and reactivity of a mononuclear copper(II) end-on superoxo complex
空间要求高的三足四齿tren配体中的铜(I)-分子氧反应性。
  • DOI:
    10.1002/ejic.201290089
  • 发表时间:
    2012
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
    Kobayashi;Y.;Okubo;K.;Nomura;T.;Kubo;M.;Fujieda;N.;Sugimoto;H.;Fukuzumi;S.;Goto;K.;Ogura;T.;Itoh;S
  • 通讯作者:
    S
Spectroscopic and computational characterization of CuII-OOR (R = H or cumyl) complexes bearing a Me6-tren ligand.
水溶液中の蛋白質の高感度時間分解赤外分光測定
水溶液中蛋白质的高灵敏度时间分辨红外光谱测量
  • DOI:
  • 发表时间:
    2011
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
    久保稔;山口悟;望月正雄;吉川信也;小倉尚志;中島聡
  • 通讯作者:
    中島聡
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KUBO Minoru其他文献

Visualization of Enzymatic Reactions Using SACLA
使用 SACLA 可视化酶反应
  • DOI:
    10.2142/biophys.59.205
  • 发表时间:
    2019
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
    TOSHA Takehiko;KUBO Minoru
  • 通讯作者:
    KUBO Minoru

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