がん細胞は自身の生存をかけ放射線域を逃れるべく上皮間葉移行をなしうるか

癌细胞能否经历上皮间质转化以逃离辐射区以求生存？

• 批准号: 24390285
• 负责人: 西岡 健
• 金额: $ 6.07万
• 依托单位: Hokkaido University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
• 财政年份: 2012
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2012-04-01 至 2015-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-24390285/
• 关键词: 放射線生物学; UTR; HIF; HIF-1a; trascription; translation; 放射線治療; 低酸素; HIF/alpha

今年度の実験において我々は5'UTRおよび3'UTR依存性発現調節の候補遺伝子の機能解析を行った。5'UTR結合タンパク質に関してはSRSFファミリーが有望であると考えられた。これらタンパク質はHIF-laあるいはcMYCの5'UTRを挿入したルシフェラーゼリポーターからのタンパク質発現を数倍に活性化することができた。これら候補遺伝子の発現を、マイクロアレイにて比較したところ、予想通り高転移性株では発現が高い傾向が認められた。これらの発現が遺伝子プロモーター領域の配列の違いによるものか否かを判断するため、アレイ解析に用いた細胞のゲノムDNAを出発材料にしてプロモーター領域のシークエンスを行ったところ顕著な塩基置換は認められず、メチル化などのエピジェネティックな変化の解析が今後の課題として提起された。3'UTR依存性発現調節の候補遺伝子としてELAVLファミリータンパク質の1つであるELAVL2の機能解析を行った。ELAVL1はほぼ全ての細胞において多量に発現し主に核局在を示すが、ELAVL2は主に細胞質に局在する。ELAVL2導入細胞株ではELAVL1を導入した細胞よりも、ARE mRNA由来のタンパク質発現レベルが有意に上昇していた。蛍光タンパク質タグを付与したHuRを単独で強制発現させてもELAVL1は核局在を示したが、ELAVL1とELAVL2を同時に発現させた細胞では細胞質局在するELAVL1が認められた。two-hybrid法にて、ELAVL1どうしの結合よりELAVL1-ELAVL2間のほうがより強い結合であることが示された。この結合にはELAVL2のN末端、C末端領域が必要であった。ELAVL1の核から細胞質への局在変化にはELAVL2が大きく関わっていること、ELAVL2の発現量はがん細胞の悪性度と相関することが示唆された。これまで3'UTR依存性の翻訳抑制機構を担うと報告されてきたELAVL1はむしろHIF-1αの翻訳効率を低下させることが示され、従来考えられてきた調節機構はより複雑なものであることが示唆された。

This year's implementation of the program is based on the functional analysis of candidate genes for 5'UTR and 3'UTR dependency generation regulation. 5'UTR is associated with the quality of the product. The 5'UTR of cMYC is activated several times in the presence of HIF-la. This is the first time that a candidate has been identified. The present invention relates to a method for determining whether a DNA gene is generated by a gene in a cell, and a method for analyzing a DNA gene in a cell. 3'UTR dependency generation and regulation candidate gene analysis of ELAVL 2 ELAVL1 has a large number of cells in the whole cell, and ELAVL2 has a large number of cytoplasmic cells. ELAVL2-introduced cell lines are intentionally up-regulated in response to ELAVL1-introduced cells and ARE mRNA origin. ELAVL1 is the only one that can be detected in the cytoplasm. Two-hybrid method, ELAVL 1, ELAVL1, ELAVL 2, ELAVL2, ELAVL1, ELAVL2, ELAVL2, ELAVL 1, ELAVL2 The N-terminal and C-terminal domains of ELAVL2 are necessary for binding. ELAVL1 nuclear and cytoplasmic changes in the ELAVL2 gene expression, ELAVL2 gene expression, and ELAVL2 gene expression. The 3'UTR dependent inversion suppression mechanism is reported to be lower than the HIF-1α inversion rate.

项目成果

X-Ray Irradiation Induces Mitophagy and Cancer Metabolic Reprogramming

X 射线照射诱导线粒体自噬和癌症代谢重编程

• 发表时间: 2014
• 作者: T. Nishioka;H. Shirato M. Yasuda
• 通讯作者: H. Shirato M. Yasuda

Cell type-specific reciprocal regulation of HIF1A gene expression is dependent on 5'-and 3'-UTRs

HIF1A 基因表达的细胞类型特异性相互调节依赖于 5-和 3-UTR

• DOI: 10.1016/j.bbrc.2014.04.058
• 发表时间: 2014
• 期刊: Biochem Biophys Res Commun
• 作者: Yasuda M;Hatanaka T;Shirato H;Nishioka T
• 通讯作者: Nishioka T

HIF-1alpha Post Transcriptional mRNA Regulation Under Normoxia

常氧条件下 HIF-1alpha 转录后 mRNA 调控

• 作者: Takeshi Nishioka;Hiroki Shirato;Motoaki Yasuda
• 通讯作者: Motoaki Yasuda

Activating transcription factor 5 enhances radioresistance and malignancy in cancer cells.

• DOI: 10.18632/oncotarget.2912
• 发表时间: 2015-03-10
• 期刊: Oncotarget
• 作者: Ishihara S;Yasuda M;Ishizu A;Ishikawa M;Shirato H;Haga H
• 通讯作者: Haga H

Irradiation-tolerant lung cancer cells acquire invasive ability dependent on dephosphorylation of the myosin regulatory light chain

• DOI: 10.1016/j.febslet.2013.01.055
• 发表时间: 2013-03-18
• 期刊: FEBS LETTERS
• 影响因子: 3.5
• 作者: Ishihara, Seiichiro;Yasuda, Motoaki;Haga, Hisashi
• 通讯作者: Haga, Hisashi