再生医療本格化に向けた上皮－間充織相互作用と分化機構の解明

阐明全面再生医学的上皮间质相互作用和分化机制

• 批准号: 14J07346
• 负责人: 亀石 統子
• 金额: $ 1.28万
• 依托单位: Waseda University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2014
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2014-04-25 至 2016-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-14J07346/
• 关键词: 角膜上皮; 上皮幹細胞; Side population; シングルセルQPCR; 角膜; 創傷モデル; 組織修復

本研究は「角膜上皮幹細胞様細胞（Side population: SP 細胞）の表現型解明」を目指し、次世代シークエンサ、Gene ontology 解析、定量的遺伝子発現解析（QPCR）、シングルセルQPCR、免疫組織化学的解析を遂行した。特異的抗体を用いず、核染色に使用されるHoechst 33342 を用いた染色により同定されるSP 細胞をシングルセル解析に供した。その結果、角膜上皮幹細胞が存在すると考えられる輪部上皮より単離した細胞であるにもかかわらず、このSP細胞は上皮細胞というよりはむしろ血管内皮細胞または間葉系細胞様の表現型を有する細胞集団であることを明らかにした。さらに、このSP 細胞を低酸素下で培養すると分裂を開始し、さらに培養SP 細胞を免疫組織化学的解析に供したところ、上皮細胞マーカーを発現することが示唆された。この研究成果を日本再生医療学会と国際幹細胞シンポジウムで発表を行うと共に、英字学術論文に受理された。

This study youdaoplaceholder6 "corneal epithelial stem cell-like cells (Side population:) SP cells) の phenotype interpret "を refers し, next generation シ ー ク エ ン サ, Gene ontology, quantitative but 伝 発 now parse (QPCR), シ ン グ ル セ ル QPCR, immunohistochemical analysis を carries out し た. Specific antibody を with い ず, nuclear staining に use さ れ る Hoechst 33342 を using い た dyeing に よ り with fixed さ れ る SP cells を シ ン グ ル セ ル parsing に for し た. そ の results, corneal epithelium stem cells have す が る と exam え ら れ る wheel of epithelial よ り 単 from し た cells で あ る に も か か わ ら ず, こ の SP は epithelial cells と い う よ り は む し ろ endothelial cells ま た は mesenchymal cell others の phenotype を have す る cells sets 団 で あ る こ と を Ming ら か に し た. を さ ら に, こ の SP cells under low acid element で cultivate す る と split を began し, さ ら に develop analytical に を immunohistochemical SP cells for し た と こ ろ, epithelial cells マ ー カ ー を 発 now す る こ と が in stopping さ れ た. こ の research を Japan international stem cell regeneration medical society と シ ン ポ ジ ウ ム で 発 table line を う と に total academic papers, English word に accept さ れ た.

项目成果

Remodeling of epithelium and type IV collagen on corneal epithelial deficiency model.

角膜上皮缺陷模型上皮和 IV 型胶原的重塑。

• 发表时间: 2014
• 作者: Kameishi S;Sugiyama H;Yamato M;Sado Y;Namiki H;Kato T;and Okano T.
• 通讯作者: and Okano T.

RNA シークエンスを用いたウサギ輪部上皮Side population 細胞の表現型解明

使用 RNA 测序阐明兔角膜缘上皮侧群细胞的表型

• 发表时间: 2016
• 作者: 亀石統子;梅本晃正;松崎優;藤田雅子;岡野光夫;加藤尚志;大和雅之
• 通讯作者: 大和雅之

Remodeling of epithelial cells and basement membranes in a corneal deficiency model with long-term follow-up

• DOI: 10.1038/labinvest.2014.146
• 发表时间: 2015-02-01
• 期刊: LABORATORY INVESTIGATION
• 影响因子: 5
• 作者: Kameishi, Sumako;Sugiyama, Hiroaki;Okano, Teruo
• 通讯作者: Okano, Teruo

Limbal epithelial side population cells have an endothelial and/or mesenchymal-like phenotype with somatic stem or progenitor cell markers

角膜缘上皮侧群细胞具有内皮和/或间充质样表型，具有体干细胞或祖细胞标记

• 发表时间: 2014
• 作者: Kameishi S;Umemoto T;Matsuzaki Y;Sugiyama H;Okano T;Kato T;and Yamato M.
• 通讯作者: and Yamato M.

Rabbit limbal epithelial side population cells have a somatic stem and/or progenitor cell phenotype with endothelial cell markers

兔角膜缘上皮侧群细胞具有带内皮细胞标记的体细胞干细胞和/或祖细胞表型

• 发表时间: 2015
• 作者: Sumako Kameishi;Terumasa Umemoto;Yu Matsuzaki;Masako Fujita;Teruo Okano;Takashi Kato;and Masayuki Yamato.
• 通讯作者: and Masayuki Yamato.