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同一複合体上に存在する脱アデニル化酵素ＣＡＦ１とＣＣＲ４の作用機構解析

同一复合物上脱腺苷酸酶 CAF1 和 CCR4 的机制分析

基本信息

批准号：
14J08195
负责人：
新沼翔
金额：
$ 1.86万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2014
资助国家：
日本
起止时间：
2014-04-25 至 2017-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

真核生物におけるほとんどのmRNAは3′末端にアデニンが連続する配列、ポリ(A)鎖を持つ。細胞質におけるmRNAの分解は、主としてポリ(A)鎖の分解反応である「脱アデニル化」から始まる。脱アデニル化は主にCCR4-NOT複合体がmRNA上に誘導されることで起こる。本研究で用いたショウジョウバエにおいて、CCR4-NOT複合体の構成因子の内、脱アデニル化活性を持つ因子はCAF1とCCR4の2つである。しかし、CCR4-NOT複合体がCAF1とCCR4という2つの脱アデニル化酵素を持つ生物学的意義は不明である。本研究の目的は、未だ明らかにされていないCAF1とCCR4の使い分け、あるいは協調的作用を生化学的に明らかにすることである。CAF1及びCCR4はアデニンに強い選択性を持ち、3′末端から一塩基ずつRNAを分解する性質を持つ。しかし本研究のこれまでの結果から、CAF1もしくはCCR4はアデニン以外の塩基を持つRNAを分解できる場合があることが示唆された。本研究ではアデニン以外の塩基選択性にCAF1とCCR4の違いがある可能性を考え、酵素学的な解析を行った。しかしCAF1とCCR4に違いはなく、どちらも上流にポリ(A)配列があれば、3′末端の塩基を問わずRNAを分解できることがわかった。この結果はRNA journalに投稿され、公開された。CAF1とCCR4の解析を行う過程で、精製したCAF1及びCCR4はその反応にATPを必要としないが、一方でCCR4-NOT複合体による脱アデニル化にはATPが必要であるとする先行研究があることがわかった。そこで脱アデニル化反応におけるATPの必要性について再検証したところ、実はCCR4-NOT複合体の脱アデニル化反応にATPは必要ないことがわかった。この結果もRNA journalに投稿され、公開された。

Eukaryotes are divided into two groups: eukaryotes, eukaryotes and eukaryotes. The mRNA is decomposed, and the main component is decomposed. (a) the decomposition is reversed. The primary CCR4-NOT complex has been successfully activated. This is the first step on the mRNA. In this study, we used the CCR4-NOT complex to form a factor, CAF1 CCR4 2 to form a factor, and to maintain the activity of the factor. The biological meaning of the enzyme is not known in the sense of biology, the meaning of CAF1 and CCR4-NOT complex is unknown. In this study, the purpose of this study is to clarify the role of CAF1 CCR4 in biochemistry. CAF1 and CCR4 devices are required to select optional and 3 'end RNA to decompose sexual properties. This study is based on the results of the results of this study, and the results of this study. The results of this study are as follows: the results of this study, the results of this study. The purpose of this study is to select the basis of CAF1, CCR4, possibility, and analysis of zymology. "CAF1 CCR4", "upstream" (A), and 3 'end, "base", "RNA", "decompose", "run", "run". The results show that RNA journal has submitted contributions and made public contributions. CAF1 CCR4 to analyze the process, CAF1 and CCR4 to reverse ATP. One side of the CCR4-NOT complex is necessary. The ATP needs to be studied before it is completed. It is necessary to modify the anti-ATP complex, the CCR4-NOT complex and the ATP complex. The results show that RNA journal has submitted contributions and made public contributions.