肉質向上を目指した骨格筋線維の遺伝子発現プロファイル・タイプ変換機構の解明

阐明骨骼肌纤维的基因表达谱和类型转换机制，旨在改善肉质

• 批准号: 14J40234
• 负责人: 澤野 祥子
• 金额: $ 1.16万
• 依托单位: Kyushu University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2014
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2014-04-25 至 2015-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-14J40234/
• 关键词: 骨格筋; 筋線維タイプ; 遺伝子発現

食肉として利用される家畜・家禽の筋肉は、収縮特性や代謝特性の違いから遅筋タイプ（1 型）、速筋タイプ（2B 型）、その中間の2A, 2X 型に分類される。食肉の肉質や栄養機能性を決定する上で、筋線維タイプ組成は非常に重要な因子であるが、現在まで、肉質を左右する筋線維タイプの様々な特性について、定量的な評価はほとんどされていない。本研究は、各々のタイプの筋線維がどのような構成要素で成り立っているか、またタイプ間で、それらがどの程度異なり、どう相互変換するかを明らかにする事を目的としている。まず、4種類それぞれの筋線維の構成要素について、遺伝子発現を網羅的に解析し(RNA-Seqを利用）、プロファイリングを進めることを目指した。そのために、本年度（10月より半年間）は、4種類の筋線維を迅速に分類する手法を検討した。生細胞（生筋線維）に蛍光標識1次抗体（申請者らが開発）を導入する方法を試みた結果、各タイプごとに生細胞を視覚的に分類することに成功した。しかしながら、染色に一定の時間を要したため、intactな状態を反映した遺伝子発現プロファイリングが可能かどうかは疑問が残った。そこで、スチーム固定により細胞の活動を停止した後、4種類の筋線維を分類する手法の開発を推し進めた。通常行う100℃、5分間の条件下でのスチーム固定では高品質のRNAが抽出できなかったため、よりマイルドな条件（55℃、5分間）で固定を行った。その結果、マイルドな条件下でも、4種類の筋線維の視覚的分類が可能なこと、かつ、高品質のRNAが細胞から抽出できることを確認した。今後、レーザーマイクロダイセクション等を用いて、4種の筋線維を分別して取得し、それぞれのRNAを抽出後、RNA-Seqによるプロファイリングの実現を目指す。

Carnivorous utilization of livestock and poultry muscle, contraction characteristics, metabolic characteristics of the middle of the muscle (type 1), fast muscle (type 2B), the middle of the 2A, 2X classification Meat quality is determined by the function of meat quality, muscle line dimension composition is a very important factor, now, meat quality, muscle line dimension and quality characteristics, quantitative evaluation is very important. This study aims to establish the structural elements of each type of tendon dimension, to establish the relationship between the two types of tendon dimensions, and to change the relationship between them. The four types of DNA are included in the analysis of DNA, the development of DNA, and the development of DNA. This year (October to June), four types of tendon dimensions were quickly classified and discussed. The method of introducing the primary antibody (developed by the applicant) into the living cell (living muscle line) was tested and the classification of each living cell was successful. For a certain time, the stain should be reflected in the state of the stain, and the stain should be reflected in the state of the stain. After the cell activity stops, the development of the four kinds of tendon dimension classification is promoted. Usually run at 100℃ for 5 minutes, fix the RNA with high quality, and run at 55℃ for 5 minutes. The results show that the classification of 4 kinds of tendon dimensions is possible under different conditions, and the high-quality RNA is extracted from the cells. In the future, the application of the gene, the acquisition of four kinds of tendon dimensions, the extraction of RNA, and the implementation of RNA-Seq gene will be directed.

项目成果

Supplementary immunocytochemistry of hepatocyte growth factor production in activated macrophages early in muscle regeneration.

• DOI: 10.1111/asj.12264
• 发表时间: 2014-12
• 期刊: Animal science journal = Nihon chikusan Gakkaiho
• 作者: S. Sawano;Takahiro Suzuki;Mai-Khoi Q. Do;H. Ohtsubo;W. Mizunoya;Y. Ikeuchi;R. Tatsumi

筋幹細胞由来の分泌性因子Sema3Aによる筋線維型自律制御機構

肌肉干细胞分泌因子Sema3A的肌纤维型自主控制机制

• 发表时间: 2014
• 作者: 鈴木貴弘;大屋雄暉;澤野祥子;大坪秀明;水野谷航;中村真子;池内義秀;辰巳隆一
• 通讯作者: 辰巳隆一

遅筋は速筋に比べ脂肪酸取込および脂肪合成能に優れる

与快肌纤维相比，慢肌纤维具有优越的脂肪酸摄取和脂肪合成能力。

• 发表时间: 2015
• 作者: 小宮佑介;澤野祥子;田嶋悠璃;Johan Rung;辰巳隆一;中村真子;池内義秀;水野谷航
• 通讯作者: 水野谷航

Sema3A secreted from satellite cells promotes slow-twitch fiber generation.

卫星细胞分泌的 Sema3A 促进慢肌纤维的生成。

• 发表时间: 2014
• 作者: Suzuki;T.;Ohya;Y.;Ojima;K.;Mizunoya;W.;Sawano;S.;Ohtsubo;H.;Nishimatsu;S.;Anderson;J. E.;Do;M.-K. Q.;Nakamura;M.;Furuse;M.;Ikeuchi;Y.;Nohno;T.;and Tatsumi;R.
• 通讯作者: R.

Anti-inflammatory macrophages implicate in regenerative moto-neuritogenesis, by promoting myoblast migration and Sema3A expression.

抗炎巨噬细胞通过促进成肌细胞迁移和 Sema3A 表达参与再生运动神经元发生。

• 发表时间: 2014
• 作者: Sakaguchi;S.,* Shono;J.,* Suzuki;T.,* Sawano;S.;Anderson;J.E.;Do;M.-K.Q.;Ohtsubo;H.;Mizunoya;W.;Nakamura;M.;Furuse;M.;Ikeuchi;Y.;and Tatsumi;R. (*equal contributors)
• 通讯作者: R. (*equal contributors)