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不妊化雑種海産魚を用いた始原生殖細胞欠損機構の解明および代理親魚技術への利用

利用不育杂交海鱼阐明原始生殖细胞缺失机制及其在替代亲鱼技术中的应用

基本信息

批准号：
15F15397
负责人：
竹内裕
金额：
$ 1.47万
依托单位：
Kagoshima University (2016-2017)Tokyo University of Marine Science and Technology (2015)
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2015
资助国家：
日本
起止时间：
2015-11-09 至 2018-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

ニベとシログチの交雑種は始原生殖細胞（PGCs）の細胞自律的な増殖不全に起因する生殖細胞欠損型の不稔性を示す。しかし、本雑種のPGCsで見られる増殖不全についての詳細な分子メカニズムは分かっていない。本研究では、RNA-Seqを用いた網羅的遺伝子発現解析により、PGCsの増殖不全に関与する遺伝子群の選定を目指した。ニベ成熟卵巣・未熟生殖腺・生殖腺原基、シログチ成熟卵巣、不稔化雑種生殖腺・生殖腺原基からTotal RNAを精製し、Hiseq 2500を用いたRNA-seqおよびTrinity・RSEMを用いた発現変動解析により、雑種とニベの生殖腺原基間で発現量の異なる遺伝子を取得した。つぎに、細胞周期および細胞増殖に関連する遺伝子群についてKAASを用いたパスウェイ解析を実施した。全ての発現変動遺伝子から生殖細胞で発現している遺伝子を効率的に濃縮するため、ニジマス精原細胞発現遺伝子との照合を行った。得られた遺伝子の一部について、qPCRによる発現量解析およびin situ hybridization（ISH）による発現細胞の特定を行った。雑種とニベの生殖腺原基間での発現変動遺伝子として、2195遺伝子を取得した。パスウェイ解析では、細胞周期系やシグナル伝達経路系の発現異常が確認され、PGCsの増殖不全との関連が示唆された。また、PGCsで発現している遺伝子の候補として95遺伝子を選抜した。このうち5遺伝子について、qPCRにより発現変動についての再現性を確認し、ISHによりニベPGCsでの発現を確認した。この結果から、ニジマス精原細胞発現遺伝子との照合により選抜した遺伝子群には、PGCｓで発現し、かつ、雑種とニベ間で発現変動が生じている遺伝子が含まれていることが明らかとなった。

The cause of aproliferation of primordial germ cells (PGCs) in the nasopharyngeal species is the cause of autonomic cell regulation and the manifestation of dysplasia in the germ cell deficiency type.しかし、本雑 speciesのPGCsで见られるAproliferation についてのDetailsなmoleculesメカニズムは分かっていない. In this study, RNA-Seq was used to analyze the selected genes of the remaining subgroups collected in the network, and the selected items of PGCs were amplified and the remaining subgroups were selected.ニベMature eggs, immature gonads, gonad primordium, シログチmature ovum, uncontaminated gonads, gonad primordia, Total RNA, Hiseq 2500 RNA-seq was used for Trinity・RSEM and the dynamic analysis was performed using the RNA-seq.つぎに、Cell cycle および Cell proliferation にrelated する伝子群についてKAASを Use いたパスウェイanalytic を実事した. All the ての発appears to move the remaining 伝子からThe germ cell で発 appear している伝子をefficiency にconcentrationするため, ニジマスspermatogonia 発开伝子との Zhao合を行った. The results of qPCR analysis and situ hybridization (ISH) of specific cells are obtained. The antagonism between the gonad primordia of the species is now changed, and the remaining 2195 is the original one.パスウェイ analysis では, cell cycle system やシグナル伝da 経 Road system の発 appear abnormal が confirmation され, PGCs の aproliferative imperfection との correlation が indication された.また, PGCs で発 appear している缝子の candidate として95 缝子を选抜した.このうち5缝子について, qPCR により発行についてのreassurability をconfirmationし, ISH によりニベPGCs での発appears をconfirmation した.このRESULTSから、ニジマスspermatogonia are now left 伝子との恮淊合により选抜した缝子组には、PGCｓで発Now し, かつ, 雑 kind とニベ间で発 appear 変动が生じている伝子が contain まれていることが明らかとなった.

项目成果

期刊论文数量（0）

专著数量（0）

科研奖励数量（0）

会议论文数量（0）

专利数量（0）

Efficient production of donor-derived gametes from triploid recipients following intra-peritoneal germ cell transplantation into a marine teleost, Nibe croaker (Nibea mitsukurii)

DOI：
10.1016/j.aquaculture.2016.05.011
发表时间：
2017-09
期刊：
Aquaculture
影响因子：
4.5
作者：
H. Yoshikawa;Y. Takeuchi;Yasuko Ino;Junjie Wang;G. Iwata;N. Kabeya;R. Yazawa;G. Yoshizaki
通讯作者：
H. Yoshikawa;Y. Takeuchi;Yasuko Ino;Junjie Wang;G. Iwata;N. Kabeya;R. Yazawa;G. Yoshizaki

Induction of meiotic gynogenesis in yellow drum (Nibea albiflora, Sciaenidae) using heterologous sperm and evidence for female homogametic sex determination