なぜ血管炎症候群は起こるか―血管内皮・周皮細胞機能と二次的遺伝子変異に着目して―

为什么会发生血管炎综合征？关注血管内皮/周细胞功能和继发性基因突变

• 批准号: 15J00292
• 负责人: 神田 真聡
• 金额: $ 1.22万
• 依托单位: Hokkaido University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2015
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2015-04-24 至 2017-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-15J00292/
• 关键词: iPS細胞; 疾患特異的iPS細胞; 大動脈炎症候群; 血管内皮細胞

本研究では、血管炎症候群患者の血管内皮細胞の機能異常を証明することを目標に研究を進めた。血管炎症候群患者の血管内皮細胞を直接得ることが難しいことから、iPS細胞を用いた研究を行った。大動脈炎症候群患者末梢血単核球からセンダイウイルスベクターを用いて、大動脈炎症候群患者由来のiPS細胞を誘導した。多分化能の評価として、免疫染色・mRNA発現解析・核型検査・NOD-SCIDマウスを用いた奇形腫形成能を確認し、iPS細胞の樹立に成功した。次に作製したiPS細胞から血管内皮細胞の分化誘導を行った。分化誘導プロトコールは既報告のフィーダーフリー分化誘導を中心に行ったが、大動脈炎症候群患者由来のiPS細胞から血管内皮細胞を効率よく分化誘導できなかった。そこで既報告の論文を参考にし、古典的なOP-9を用いた分化誘導法や、胚様体を用いた誘導方法を応用しながら血管内皮細胞の誘導を試みたが、分化誘導効率の改善は得られなかった。最終的には血管内皮分化誘導プロトコールを一から見直し、独自の血管内皮細胞の分化誘導法を樹立した。Wntシグナルを活性化するサイトカイン・低分子化合物を用いることで、高効率で中胚葉細胞を誘導することに成功した。また、Lateral plate mesodermが血管内皮前駆細胞の形成に重要であることから、必要な誘導因子を添加することにより、高効率に血管内皮前駆細胞を誘導することに成功した。この誘導前駆細胞はVEGFを大量に添加した培地で培養すると血管内皮細胞に分化した。この方法により、大動脈炎症候群患者由来のiPS細胞から血管内皮細胞を高効率で誘導することができた。最後に、健常人あるいは大動脈炎症候群患者のiPS細胞から誘導された血管内皮細胞の機能比較解析を行ったが、研究期間内に特定の機能異常を同定するには至らなかった。今後更なる検討による展望が期待される。

In this study, patients with vascular inflammatory syndrome and vascular endothelial cell cytology were able to evaluate the progress of the study. In patients with vascular inflammatory syndrome, the "vascular endothelial cells" were directly obtained from the patients with vascular inflammation syndrome, and the iPS cells were used to study the vascular endothelial cells. The peripheral blood of patients with inflammatory syndrome of hyperkinesia, the peripheral blood of patients with inflammatory syndrome, the peripheral blood of patients with inflammatory syndrome, the patients with inflammatory syndrome. The karyotype was identified by mRNA immunostaining, the karyotype was confirmed by singularity formation by immunostaining, and the iPS cells were established successfully. The second step was to guide the differentiation of vascular endothelial cells in the presence of iPS cells. Differentiation and differentiation were not only reported in the center of differentiation, but also in patients with inflammatory syndrome such as iPS, vascular endothelium, cell differentiation and differentiation. Both reports and articles are referenced, classical OP-9 is differentiated by differentiation, embryo is guided by vascular endothelial cells, and differentiation is improved. The most important method of vascular endothelial differentiation is to differentiate vascular endothelial cells in a straight and independent manner. The low molecular weight compound (LMCs) was successfully activated by Wnt. The cells of mesoderm cells with high molecular weight were used successfully. The precursors of vascular endothelium and Lateral plate mesoderm form important endothelial cells, the necessary factors are added, and the cells of vascular endothelial cells with high incidence lead to success. Prior to the induction, a large number of cells were added to the VEGF to differentiate into vascular endothelial cells. Methods the patients with inflammatory syndrome caused by iPS, vascular endothelial cells, high frequency and high incidence of inflammatory syndrome were detected. In the end, normal people and normal people were able to compare the ability of iPS cells to analyze vascular endothelial cells in patients with inflammatory syndrome. During the study period, specific machines were able to determine the number of patients with inflammatory syndrome at the same time. In the future, we will continue to look forward to the future.

项目成果

Post-steroid neuropsychiatric manifestations are specific to SLE and predict better prognosis compared with de novo NPSLE

类固醇后神经精神症状是 SLE 特有的，与新发 NPSLE 相比，可以预测更好的预后

• 发表时间: 2016
• 作者: Shimizu Y;Yasuda S;Kanda M;Kono M;Nakamura H;Hisada R;Omura K;Shimamura S;Shida H;Kato M;Oku K;Bohgaki T;Horita T;Atsumi T
• 通讯作者: Atsumi T

Kanda M, Yamanaka H, Kojo S, Harada M, Taniguchi M, Atsumi T, Wada H, Baghdadi M, Seino K. Basic helix-loop-helix transcription factor family, member e40 works as a cofactor of T-bet in the regulation of IFN-γ production in iNKT cells

Kanda M, Yamanaka H, ​​Kojo S, Harada M, Taniguchi M, Atsumi T, Wada H, Baghdadi M, Seino K. 基本螺旋-环-螺旋转录因子家族，成员 e40 作为 T-bet 的辅助因子iNKT 细胞中 IFN-γ 产生的调节

• 发表时间: 2016
• 作者: Kanda M;Yamanaka H;Kojo S;Harada M;Taniguchi M;Atsumi T;Wada H;Baghdadi M;Seino K
• 通讯作者: Seino K