ＤＮＡ医薬による花粉症治療のための溶解性マイクロニードルパッチの開発

花粉症は、花粉に特異的なIgG抗体とIgE抗体の産生バランスが崩れ、IgE抗体の産生が優勢になることによって引き起こされる。クラスBのCpG ODN (CpG-B)には、Th1経路を活性化してIgG2a抗体の産生を増加させる一方、Th2経路で産生されるIgE抗体の産生量を抑制する効果がある。本研究は、クラスBのCpG ODNの経皮デリバリーのための溶解性マイクロニードルパッチを開発することを目的とする。モデルアレルゲンとしてovalbumin (OVA) を用い、CpG-Bとともに平成28年度に開発したゼラチンマイクロニードルに内包した。FITCでラベルしたCpG-BとAlexa 647でラベルしたOVAにより、マイクロニードル内でCpG-BとOVAがほぼ均一に分布していることを確認した。また、ゼラチンマイクロニードルは培地中で1時間以内に溶解し、マイクロニードルの溶解によって溶出したCpG-Bはマウスマクロファージ細胞株であるRAW264.7に作用し炎症性サイトカインであるインターロイキン (IL)-12 とIL-6を誘導させた。次に、ゼラチンマイクロニードルを用いて、OVAおよびCpG-Bをマウスの剃毛した背部から1週間おきに3回投与し、血清中のOVA特異的IgG1抗体およびIgG2a抗体を測定した。ゼラチンマイクロニードルによるOVA特異的IgG1抗体の誘導量は、OVAとCpG-Bをマイクロニードルを用いずに注射で投与したときのIgG1抗体の誘導量と変わらず、マイクロニードルが注射による皮下投与と変わらないIgG1誘導を行えることを確認した。一方、OVA特異的IgG2aの誘導量は注射による投与に比べて低かった。目的とするIgG2a抗体の誘導能がゼラチンマイクロニードルで低かったことは期待に反する結果であり、この原因と改良が今後の課題である。

花粉症は、花粉に特異的なIgG抗体とIgE抗体の産生バランスが崩れ、IgE抗体の産生が優勢になることによって引き起こされる。クラスBのCpG ODN (CpG-B)には、Th1経路を活性化してIgG2a抗体の産生を増加させる一方、Th2経路で産生されるIgE抗体の産生量を抑制する効果がある。本研究は、クラスBのCpG ODNの経皮デリバリーのための溶解性マイクロニードルパッチを開発することを目的とする。モデルアレルゲンとしてovalbumin (OVA) を用い、CpG-Bとともに平成28年度に開発したゼラチンマイクロニードルに内包した。FITCでラベルしたCpG-BとAlexa 647でラベルしたOVAにより、マイクロニードル内でCpG-BとOVAがほぼ均一に分布していることを確認した。また、ゼラチンマイクロニードルは培地中で1時間以内に溶解し、マイクロニードルの溶解によって溶出したCpG-Bはマウスマクロファージ細胞株であるRAW264.7に作用し炎症性サイトカインであるインターロイキン (IL)-12 とIL-6を誘導させた。次に、ゼラチンマイクロニードルを用いて、OVAおよびCpG-Bをマウスの剃毛した背部から1週間おきに3回投与し、血清中のOVA特異的IgG1抗体およびIgG2a抗体を測定した。ゼラチンマイクロニードルによるOVA特異的IgG1抗体の誘導量は、OVAとCpG-Bをマイクロニードルを用いずに注射で投与したときのIgG1抗体の誘導量と変わらず、マイクロニードルが注射による皮下投与と変わらないIgG1誘導を行えることを確認した。一方、OVA特異的IgG2aの誘導量は注射による投与に比べて低かった。目的とするIgG2a抗体の誘導能がゼラチンマイクロニードルで低かったことは期待に反する結果であり、この原因と改良が今後の課題である。