血中ホルモン量を用いたサケ科魚類の成長率評価体系の構築

本申請は、サケ科魚類の成長率を評価するための複数の生理学的指標を確立し、これらを組み合わせた安定かつ高感度な成長率評価体系の構築することを目的とした。魚類の成長はインスリン様成長因子-I（IGF-I）およびIGF結合蛋白（IGFBP）が重要な役割を果たす。また、サケ科魚類の血中には少なくとも3種類のIGFBP（IGFBP-1a, -1b, -2b）が存在し、IGF-Iの活性をコントロールしている。血中のIGF-IおよびIGFBP-1bはそれぞれ正および負の成長指標としての有用性が期待されている。また、IGFBP-1aと呼ばれるタイプは、強い異化状態下で血中に誘導されると考えられているが、詳細な機能は不明であり、かつ血中量を測定する方法は確立されていない。当該年度は、まず血中IGFBP-1aの時間分解蛍光免疫測定法（TR-FIA）の確立を行った。大腸菌発現系で作製した組換えサクラマスIGFBP-1aを家兎に免疫して抗血清を作製し、また組換え蛋白をビオチンで標識することで、競合法によるTR-FIAの確立を試みた。結果、良好な標準曲線が得られ、かつサクラマスやニジマスといった他のサケ科魚類の血清希釈系列と平行性が認められた。抗体の交差反応性も認められなかったため、定量系が確立できた。一方で、確立した測定系を用いて絶食・再給餌実験に供したサクラマスの血中IGFBP-1a量を測定したところ、生物学的な反応がみられていない。このことは、抗体がIGFBP-1aのフラグメントを認識している可能性を示し、生物活性をもつIGFBP-1aのみを検出する方法が求められる。また、複数の指標を組み合わせた成長率評価体系の構築を進めた。IGF-IとIGFBP-1bを組み合わせたIGF-I/BP-1b比の反応を調べ、これがそれぞれ単独とは異なる「個体の代謝状態」を反映する指標となりえることを示唆した。

本申請は、サケ科魚類の成長率を評価するための複数の生理学的指標を確立し、これらを組み合わせた安定かつ高感度な成長率評価体系の構築することを目的とした。魚類の成長はインスリン様成長因子-I（IGF-I）およびIGF結合蛋白（IGFBP）が重要な役割を果たす。また、サケ科魚類の血中には少なくとも3種類のIGFBP（IGFBP-1a, -1b, -2b）が存在し、IGF-Iの活性をコントロールしている。血中のIGF-IおよびIGFBP-1bはそれぞれ正および負の成長指標としての有用性が期待されている。また、IGFBP-1aと呼ばれるタイプは、強い異化状態下で血中に誘導されると考えられているが、詳細な機能は不明であり、かつ血中量を測定する方法は確立されていない。当該年度は、まず血中IGFBP-1aの時間分解蛍光免疫測定法（TR-FIA）の確立を行った。大腸菌発現系で作製した組換えサクラマスIGFBP-1aを家兎に免疫して抗血清を作製し、また組換え蛋白をビオチンで標識することで、競合法によるTR-FIAの確立を試みた。結果、良好な標準曲線が得られ、かつサクラマスやニジマスといった他のサケ科魚類の血清希釈系列と平行性が認められた。抗体の交差反応性も認められなかったため、定量系が確立できた。一方で、確立した測定系を用いて絶食・再給餌実験に供したサクラマスの血中IGFBP-1a量を測定したところ、生物学的な反応がみられていない。このことは、抗体がIGFBP-1aのフラグメントを認識している可能性を示し、生物活性をもつIGFBP-1aのみを検出する方法が求められる。また、複数の指標を組み合わせた成長率評価体系の構築を進めた。IGF-IとIGFBP-1bを組み合わせたIGF-I/BP-1b比の反応を調べ、これがそれぞれ単独とは異なる「個体の代謝状態」を反映する指標となりえることを示唆した。