Entwicklung eines Ansatzes zur Therapie neurodegenerativer Erkrankungen auf Basis von RNA-Interferenz am Beispiel der Prionerkrankungen

这是一种以RNAi为基础的TSEs体细胞遗传治疗的发展模型，也是原理的证明。通过引入双链RNAs（siRNAs）可以快速表达朊病毒蛋白（PrPC），从而使其韦尔登。为了在体内检测RNA干扰的PrPC缺失，韦尔登将获得一种稳定的转基因。因此我们可以通过慢病毒基因转移的方法使我们的转基因动物获得更好的效果。因此，在转基因小鼠韦尔登中，我们观察了PrPC特异性siRNA（antiPrPCsiRNA）对Scrapie-Infektion和PrPSc-Bildung的影响。随着慢病毒载体韦尔登的成熟，我们在转基因动物模型中进行了试验，从而获得了一种用于体细胞遗传治疗的方法。慢病毒基因转移可通过抗PrPC-siRNA在许多地区感染的小鼠中进行，并在瘙痒感染分析中进行辅助。我们认为抗PrPC-siRNA bzw具有潜在的暴露后抑制作用。用慢病毒siRNA-Vektoren治疗羊瘙痒症。

Ziel dieses Antrags ist die Entwicklung eines Modells zur somatischen Gentherapie von TSEs auf der Basis von RNAi als proof of principle . Durch das Einbringen von kurzen doppelsträngigen RNAs (siRNAs) kann die Expression des körpereigenen Prion-Proteins (PrPC) fast vollständig gehemmt werden. Um die RNAi-vermittelte PrPC-Depletion in vivo zu untersuchen, werden wir ein transgenes Tiermodell etablieren. Hierzu setzen wir das von uns entwickelte Verfahren der Erzeugung von transgenen Tieren durch lentiviralen Gentransfer ein. Anhand der transgenen Mäuse werden wir den Effekt der gegen PrPC gerichteten siRNA (antiPrPCsiRNA) auf den Verlauf der Scrapie-Infektion und PrPSc-Bildung untersuchen. Aufgrund der Vielseitigkeit der lentiviralen Vektoren werden dieselben Vektoren, die wir im transgenen Tiermodell getestet haben, zur Entwicklung eines Ansatzes zur somatischen Gentherapie verwendet. Mittels lentiviralen Gentransfers sollen die antiPrPC-siRNAs in mehrere Hirnregionen adulter Mäuse gebracht und anschließend der Verlauf der Scrapie-Infektion analysiert werden. Dabei wollen wir vor allem das Potential einer Postexpositionsprophylaxe durch antiPrPC-siRNA bzw. eine Therapie mit lentiviralen siRNA-Vektoren nach Infektion mit Scrapie testen.