多剤排出トランスポーターＭＡＴＥの薬剤認識機構の解明

阐明多药外排转运蛋白MATE的药物识别机制

• 批准号: 17J02425
• 负责人: 宮内 弘剛
• 金额: $ 1.79万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2017
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2017-04-26 至 2020-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-17J02425/
• 关键词: トランスポーター; X線結晶構造解析; 結晶構造; 多剤薬剤排出; 膜タンパク質

申請者は、薬剤の腎臓毒性を決定する因子である多剤排出輸送体MATEを研究テーマにし、その三次元構造を明らかにする研究を実施してきた。申請者は、X線結晶構造解析という手法を用いてこの課題に取り組んできた。タンパク質のX線結晶構造解析には、タンパク質の結晶化が必須であり、そのためには目的タンパク質を性質を保ったまま大量に精製することが必要不可欠である。ヒトに由来するMATEはその発現量が低く、また非常に不安定であったことから、精製が極めて困難であることが予想された。そこで申請者はヒトに近縁の哺乳類であるヒツジに由来するMATEが結晶化の見込みが高いことを見出し、昆虫細胞培養系を用いた発現系の最適化・精製条件の最適化・可溶化に用いる界面活性剤の組成を検討し、高純度に、そして大量にヒツジ由来のMATEを調製することに成功してきた。さらに、申請者が構造決定に成功したシロイヌナズナに由来するMATEを元に、結晶性を高める変異を導入し、結晶化を検討してきた。

The toxicity of the applicant determines the factor and excretion of the MATE. The study and the three-dimensional study show that the study is accurate. The applicant and the X-ray analysis method is used to obtain the information of the system. It is necessary to analyze the results of the X-ray analysis, the crystallization of the X-ray and the crystallization of the X-ray. The purpose is to ensure that a large amount of information is necessary. The cause of the disease is that the quantity is low, the quantity is very low, the quantity is very unstable, the quantity is very low, the quantity is very unstable, the quantity is very low, the quantity The reason for the recent development of breast cancer is that the MATE results show that the cell culture system of insects is the most efficient, the most soluble, the most soluble, the high temperature, high temperature, The applicant and the applicant are responsible for determining the origin of the success factor, the origin of the MATE, the high temperature of the crystal, and the crystallization of the crystal.