細胞外マトリックス・ビトロネクチンによる小脳顆粒神経細胞の軸索決定シグナル解明

使用细胞外基质玻连蛋白阐明小脑颗粒神经元的轴突决策信号

• 批准号: 17J02956
• 负责人: 橋本 恵
• 金额: $ 1.22万
• 依托单位: Ochanomizu University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2017
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2017-04-26 至 2019-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-17J02956/
• 关键词: ビトロネクチン; 小脳顆粒細胞; 軸索

本研究では、1)ビトロネクチン誘導性軸索決定におけるPI3K、GSK-3beta関与の解明、2)軸索決定を制御するビトロネクチン受容体探索を行ってきた。ビトロネクチン過剰/欠損下では、1本の軸索決定機構が崩壊することをすでに発見している。1)では、ビトロネクチン添加/ノックアウト下のマウス小脳顆粒細胞初代培養系にPI3K阻害剤であるwortmanninを加え、ビトロネクチン誘導性軸索決定シグナル経路を調べた。軸索解析は、軸索マーカー陽性突起を軸索とし、GFP発現により突起形態を明瞭にした上で行った。その結果、PI-3キナーゼ阻害剤によりビトロネクチンによる複数軸索を持つ細胞数増大機能が阻害された。2)では、avb5インテグリンが受容体であると検証するため、b5インテグリンを過剰発現/ノックダウンしたCGCの軸索本数を計測し、a5インテグリンの軸索決定への関与を検討した。まず、ビトロネクチン添加による複数軸索を持つ細胞割合増大効果が受容体候補のb5インテグリンのノックダウンにより打ち消され、ビトロネクチンの受容体としてavb5インテグリンが機能していることが示された。さらに、GSK3阻害剤である塩化リチウムを加え、軸索数を解析したところ、b5インテグリンのノックダウンによって打ち消されたビトロネクチンによる複数軸索形成機構促進機能低下が、GSK3beta阻害剤により打ち消された。このことから、小脳顆粒細胞において、ビトロネクチン/avb5インテグリン/PI-3キナーゼ/GSK3betaシグナル経路により軸索決定が担われていることが示された。

This study includes: (1) the relationship between PI3K and GSK-3beta and the resolution of axon-induced axon-determination; and (2) the exploration of axon-induced axon-determination receptors. 1. The axle determination mechanism fails to meet the requirements under the condition of excessive/insufficient damage. 1) PI 3K inhibitor is added to the primary culture line of granular cells, and the inducible axonal determination is regulated by PI 3K inhibitor. Axonal analysis, axonal development, GFP development, and projection morphology As a result, PI-3 is not a barrier to cell growth. 2) The number of CGC axises is measured and discussed in relation to the determination of axises. A plurality of axons are added to the cell to increase the effect of cell separation and increase the effect of cell separation. The receptor candidate is selected from the group consisting of the receptor candidate and the receptor candidate. GSK-3 inhibitor increases the number of axons, analyzes the number of axons, and reduces the promotion function of multiple axons. GSK-3 inhibitor decreases the number of axons. This is the first time that a person has ever been involved in an axonal decision.

项目成果

Vitronectin Regulates the Fibrinolytic System during the Repair of Cerebral Cortex in Stab-Wounded Mice

• DOI: 10.1089/neu.2017.5008
• 发表时间: 2017-11-15
• 期刊: JOURNAL OF NEUROTRAUMA
• 影响因子: 4.2
• 作者: Hashimoto, Kei;Ikeda, Natsumi;Miyamoto, Yasunori
• 通讯作者: Miyamoto, Yasunori

Wound healing-related properties detected in an experimental model with a collagen gel contraction assay are affected in the absence of tenascin-X

• DOI: 10.1016/j.yexcr.2017.12.025
• 发表时间: 2018-02-15
• 期刊: EXPERIMENTAL CELL RESEARCH
• 影响因子: 3.7
• 作者: Hashimoto, Kei;Kajitani, Naoyo;Matsumoto, Ken-ichi
• 通讯作者: Matsumoto, Ken-ichi

2-carba cyclic phosphatidic acid contributes to the repair of stab-wounded cerebral cortex via regulation of microglial and astrocyte cells

2-碳环磷脂酸通过调节小胶质细胞和星形胶质细胞促进刺伤大脑皮层的修复

• 发表时间: 2018
• 作者: Mari Nakashima;Kei Hashimoto;Ayana Hamano;Hiroko Ikeshima-Kataoka;Mari Gotoh;Kimiko Murakami-Murofushi;Yasunori Miyamoto
• 通讯作者: Yasunori Miyamoto

穿刺性マウス大脳皮質損傷時におけるビトロネクチンのアストロサイト活性制御

玻连蛋白对小鼠大脑皮层穿刺损伤期间星形胶质细胞活性的调节

• 发表时间: 2018
• 作者: 橋本恵;田邉昌子;池田夏実;中島麻里;池島(片岡)宏子;宮本泰則
• 通讯作者: 宮本泰則

Vitronectin regulates the fibrinolytic system and inflammation during the repair of cerebral cortex in stab-wounded mice

玻连蛋白在刺伤小鼠大脑皮层修复过程中调节纤溶系统和炎症

• 发表时间: 2017
• 作者: Mari Nakashima;Kei Hashimoto;Ayana Hamano;Hiroko Ikeshima-Kataoka;Mari Gotoh;Kimiko Murakami-Murofushi;Yasunori Miyamoto;橋本恵;橋本恵
• 通讯作者: 橋本恵