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麹菌界面活性タンパク質が固体表面上で示す分子機構の解明

阐明米曲霉表面活性剂蛋白在固体表面上表现出的分子机制

基本信息

批准号：
18J11900
负责人：
寺内裕貴
金额：
$ 0.96万
依托单位：
Tohoku University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2018
资助国家：
日本
起止时间：
2018-04-25 至 2020-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

私は、麹菌 Aspergillus oryzaeが生産する界面活性蛋白質 RolA の固体表面への吸着自己組織化機構、麹菌cutinase CutL1 との相互作用・基質分解促進機構を研究しています。RolA は固体表面に吸着し、棒状の自己組織化構造を形成するという特徴を有しています。また、RolA は固体表面に吸着後、同じく A.oryzae が産生する cutinase CutL1 を固体表面上にリクルートする性質も有しています。このRolA が固体表面に吸着した際に形成する高次構造の分子機構や、形成されたRolA膜の下層にCutL１が侵入する際の分子機構を解明するのが研究目的です。今年度は、RolA の気液界面膜（ラングミュア膜）を作製し、疎水性または親水性に改質したシリコン基板に転写、原子間力顕微鏡（AFM）観察することで、RolA の自己組織化構造形成過程の解析を行いました。その結果、RolA は2度の相転移の後、自己組織化構造を形成することが明らかになりました。また、RolA ラングミュア膜は自己組織化構造の膜とRolA棒状ミセル構造の膜の2種類の膜が重なる複層膜構造であることが明らかになりました（論文掲載済）。さらに、RolAラングミュア膜を作製する際の緩衝液のpHや塩濃度を変えることで、RolA自己組織化構造形成機構について解析を行いました。その結果、RolAは等電点に近いほど自己組織化構造を形成しやすいこと、イオン的相互作用は自己組織化構造形成機構に重要ではないことが分かりました。

Study on Interfactant Protein RolA, Sorption Mechanism of Solid Surface, Interaction of Aspergillus Cutinase CutL1 and Matrix Decomposition Promotion Mechanism for Aspergillus oryzae Production RollA solid surface adsorption, rod-like self-organized structure formation A. sorbed on a solid surface, and A.oryzae produced on a solid surface. The purpose of this study is to clarify the molecular mechanism of the formation of higher-order structures on the solid surface and the molecular mechanism of the formation of the lower layer of the RolA film. This year, RolA's liquid-phase interface film was prepared, hydrophilic modified, and coated on a substrate. Atomic force microscopy (AFM) was used to analyze the formation process of RolA's self-organization structure. As a result, RolA has a 2-degree phase shift, and its own organizational structure is formed. Two kinds of multilayer film structures with self-organizing structure and RolA rod-like structure are discussed in this paper. The pH and concentration of the buffer solution during the preparation of the RolA membrane were changed, and the RolA self-organizing structure was formed. As a result, the interaction between RolA and its near isoelectric point is important for the formation of its own organizational structure.