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細胞接着領域における張力伝達効率の能動的な向上機構の解明

阐明细胞粘附区域张力传递效率的主动改善机制

基本信息

批准号：
18J23041
负责人：
仲尾信彦
金额：
$ 1.41万
依托单位：
Kyoto University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2018
资助国家：
日本
起止时间：
2018-04-25 至 2021-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

焦点接着斑を介した骨細胞の力学刺激への応答性が、細胞局所により異なるか否かを検証するため、マウス頭蓋冠から単離した骨細胞に対して、本研究で確立したAFM技術を用いることで、細胞突起上の点などの細胞局所において疑似的な焦点接着斑を作製し、それを介して力学刺激を負荷する実験系を構築し、同時に細胞のカルシウム応答を観察した。また、同上の細胞に対して、カルシウムイオンの細胞質内への流入箇所の分布が細胞局所で異なるか否かを検証するため、免疫抗体染色法と共焦点顕微鏡を用いた細胞観察により、骨細胞表面におけるインテグリンとカルシウムイオンチャネルの局在箇所に関して調べた。さらに、焦点接着斑の振る舞いは、その足場となる細胞表層の局所的な構造、及び力学特性に依存するため、骨系細胞MC3T3-E1の表層において、AFMを用いて局所的な構造イメージングと剛性測定を行った。AFM構造イメージングにより細胞表層において、アクチン繊維と考えられる繊維状構造の不均一さ、及びそれらの構造と局所的な剛性との関係を明らかにした。細胞表層における他の不均一な局所構造として、細胞膜と考えられる低剛性の突出物が可視化され、そのサイズはアクチン皮質の分解により増大することを示した。以上のような細胞表層の局所構造の違いは、細胞接着の局所的な違いや、それにより生じる細胞内外の間における力伝達機能の違いをもたらすため、骨細胞応答の力学刺激に対する場所依存性を解明するうえで重要である。

The focus is on the mechanical stimulation of bone cells, the mechanical stimulation of bone cells, and the characteristics of cell localization. The AFM technology used in this study has been established in this studyいることで、The dot on the cell protrusion などのThe cell bureau においてsuspected なfocus then the spot を Production し、それThe mechanical stimulation and loading of the system are used to build the structure and the cells are stimulated and the cells are tested at the same time.また, Same as above, に対して, カルシウムイオンのへのinflow into the cytoplasm Distribution of cells, different cell types, no evidence of infection, immune antibody staining Method of using confocal microscopy to observe cells and bone cell surface The ンテグリンとカルシウムイオンチャネルのbureau is in the 箇sho gate and the して tune.さらに, focus point spot no vibration dance いは, その Foot field となる The local structure of the cell surface, and the mechanical properties に dependence するため, The surface layer of bone lineage cells MC3T3-E1 is measured, and the AFM is measured using the structure and stiffness of the bureau. AFM structure: cell surface layer, アクチン繊dimensional test The non-uniformity of the dimensional structure and the rigidity of the relationship between the structure and the structure are clear. The cell surface layer has an uneven structure and the cell membrane has low rigidity. Object visualization, visual decomposition of the cortex, and visualization of the material. The above-mentioned structure of the cell surface layer, the structure of the cell surface, the structure of the cell connection, and the structure of the inner and outer parts of the cell. It is important to understand the location dependence of the mechanical stimulation of the bone cell response and the function of the force.