Development of nucleotide sequence-specific in situ detection technology for methylated DNA

甲基化DNA核苷酸序列特异性原位检测技术的开发

• 批准号: 21K19354
• 负责人: 北澤 荘平
• 金额: $ 4.16万
• 依托单位: Ehime University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Challenging Research (Exploratory)
• 财政年份: 2021
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2021-07-09 至 2024-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-21K19354/
• 关键词: エピジェネティクス; メチル化シトシン; 組織細胞化学; DNAメチル化; 組織化学; 破骨細胞; 精子形成; 悪性腫瘍

申請者らは、特定の疾患・病変における対象遺伝子の発現が、病変の形態学的変化や病気の進行に応じてどのように変化しているのかを病理組織学的観察をもとに評価した上で、遺伝子発現状態の異なる病変部位から選択的に細胞を採取して、ゲノム構造解析のみならず、DNAのメチル化を主体としたエピジェネティクス解析を行うことが疾患における病理形態学的な多様性をもたらす機構の一つの重要な要因と考え、「形態学に即したエピジェネティクス研究」という新たな研究分野を開拓した。これまで、CpG-islandの過メチル化による遺伝子発現抑制について多くの研究を推進し、特定の病変部位から選別した細胞を対象として、エピジェネティク変化が及ぼす形態学的多様性について検討を行ってきた。これらの形態変化に基づくエピジェネティクス研究の過程で、申請者らは、形態や機能単位として選別された細胞集団を、DNAの塩基単位で詳細に検討し、これまで重要視されてこなかった非CpG-island領域のメチル化シトシンおよび非 CpG (CpA, CpT, CpC)のメチル化 (非定型的メチル化)が、腫瘍の発生や進展、さらには細胞分化、組織再生にも重要な役割を有することを見出し、世界に先駆けて報告してきた。当該研究は、上記研究を進めるにあたり、塩基単位での詳細なメチル化状態を検出する方法の開発の必要に迫られ、今後最も研究の必要とされる非定型的なメチル化を、細胞組織構造を保ったまま観察する応用研究へと展開する上で必要欠くべからざる技術開発研究である。現在ICONプローブというメチル化シトシンと結合し、錯体形成するプローブを使い、結合したプローブをその場で増幅させることで、光学顕微鏡で観察可能なレベルに可視化することに成功している。この成果は、Histochemistry and Cell Biologyに2022年に掲載されるに至った。

Applicants ら は, specific の disorders, diseases - に お け る like heritage seaborne 伝 son の 発 が, illness - now の morphological variations of や disease 気 の for に 応 じ て ど の よ う に variations change し て い る の か を pathological histology of 観 examine を も と に review 価 し た で, heritage 伝 son 発 different showing state の な る ill - position か ら sentaku を に cells take し て, ゲ ノ ム structure の み な ら ず, DNA の メ チ ル change を subject と し た エ ピ ジ ェ ネ テ ィ ク ス parsing line を う こ と が disorders に お け る pathomorphism な others more sexual を も た ら す agency の a つ の important な by と え test, "morphological に し た エ ピ ジ ェ ネ テ ィ ク ス research" と い う new た な research eset を pioneering し た. こ れ ま で, CpG island - ever の メ チ ル change に よ る posthumous son 伝 発 now inhibit に つ い て more く の research を し, specific の ill - position か ら choose don't し た cells を like と seaborne し て, エ ピ ジ ェ ネ テ ィ ク - が and ぼ す morphology of multiple others に つ い て 検 line for を っ て き た. こ れ ら の morphology variations に base づ く エ ピ ジ ェ ネ テ ィ ク で の ス research process, the applicants ら は, form や function 単 と し て choose don't さ れ た cells sets 団 を, DNA の salt base 単 a detailed に で beg し 検, こ れ ま で important visual さ れ て こ な か っ た the CpG island - field の メ チ ル change シ ト シ ン お よ び the CpG (CpA, CpT, CpC) の メ チ ル change (atypical メ チ ル) が, swollen sores の 発 や progress, さ ら に は cell differentiation and tissue regeneration に も cut を have important な service す る こ と を に see し, world first 駆 け て report し て き た. を は, written when the research study into め る に あ た り, salt base 単 で の detailed な メ チ ル change state を 検 out す る method の open 発 の necessary に forced ら れ, the next most も の と necessary さ れ る of atypical な メ チ ル を and cell tissue structure を っ た ま ま 観 examine す る 応 with research へ と expand す る で necessary owe く べ か ら ざ で open 発 る technology research Youdaoplaceholder0. Now ICON プ ロ ー ブ と い う メ チ ル change シ ト シ ン と し, misprinted form す る プ ロ ー ブ を い, combining し た プ ロ ー ブ を そ の field で rights of さ せ る こ と で, optical 顕 micromirror で 観 examine possible な レ ベ ル に visualization す る こ と に successful し て い る. The results of <s:1> に and Histochemistry and Cell Biologyに were published in に to った in 2022.

项目成果

Wntシグナル調節分子sFRP4の腎臓老化における機能考察

Wnt信号调节分子sFRP4在肾脏衰老中的功能思考

• 发表时间: 2023
• 作者: 原口竜摩;北澤理子;北澤荘平
• 通讯作者: 北澤荘平

in vitro共培養系を用いた破骨細胞分化における腫瘍細胞の機能考察

使用体外共培养系统对破骨细胞分化过程中肿瘤细胞的功能进行考虑

• 发表时间: 2022
• 作者: 小野 真理;北澤 理子;原口 竜摩;小原 幸弘;井上 潮音;遠香 菫;北澤 荘平
• 通讯作者: 北澤 荘平

エストロゲンはmRNAの半減期を短縮させることで破骨細胞分化因子RANKLを抑制する

雌激素通过缩短 mRNA 半衰期来抑制破骨细胞分化因子 RANKL

• 发表时间: 2022
• 作者: 三瀬 萌絵;原口 竜摩;平田 佳那;北澤 荘平;北澤 理子
• 通讯作者: 北澤 理子

実験的加齢モデルにおける破骨細胞分化因子受容体RANKのプロモータ領域CpGメチル化による発現低下

在实验性衰老模型中，启动子区域的 CpG 甲基化导致破骨细胞分化因子受体 RANK 的表达降低

• 发表时间: 2022
• 作者: 北澤 理子;原口 竜摩;谷脇 真潮;北澤 荘平
• 通讯作者: 北澤 荘平

特集編集：エピジェネティクスと病理

特色：表观遗传学和病理学

• 发表时间: 2022
• 期刊: 病理と臨床
• 作者: 北澤荘平;宇於崎宏
• 通讯作者: 宇於崎宏