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Epigenetic regulation as novel approach for organ regeneration - Learning from the stress response mechanism

表观遗传调控作为器官再生的新方法——从应激反应机制中学习

基本信息

批准号：
21K19533
负责人：
李桃生
金额：
$ 3.99万
依托单位：
Nagasaki University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Challenging Research (Exploratory)
财政年份：
2021
资助国家：
日本
起止时间：
2021-07-09 至 2024-03-31
项目状态：
已结题

项目摘要

実験１、健常成獣マウスとイモリ個体を、それぞれ低濃度酸素（8% O2）、正常酸素（20% O2）、または高濃度酸素（80% O2）状態下に２時間おいた後、肺および心臓組織を採集した。それぞれの臓器組織内における代謝関連因子およびエピジェネティック関連因子の発現の違いについて、RNA-seqまたはRT-PCR法で定量評価した。その結果、低濃度酸素刺激により、イモリ肺組織内のDnmt3α、Mbd2、Mbd3、Hdac2の発現は有意に上昇し、マウス肺組織内ではDnmt1とDnmt3αの発現が有意に低下していることが判明した。高濃度酸素下では肺組織内におけるこれらエピジェネティック関連因子の発現変化が軽微であることも判明した。これらの成果を纏めた論文を現在投稿中である。一方、心臓組織については、RNA-seq解析を行った。その結果から、特に代謝や酸化還元関連分子の発現変化がマウスとイモリ共に多く認められたが、さらなる詳細な解析を現在進行中である。実験２、イモリ下肢組織から組織細胞の単離培養と増幅を行った。健常イモリの下肢筋肉組織を採集し、我々の改良した培養方法で、イモリ下肢組織から数ヶ月間の継代培養でコンタミネーションなく、効率良く細胞増幅することに成功した。また、培養増幅した細胞は、凍結保存とRecoveryの検証も行った。さらに、培養増幅してきた細胞は、老化現象もなく、放射線照射や酸化ストレス刺激などに対する応答も実験で確認できた。これらの成果を論文に纏められ、現在投稿中（Revision）である。

1. Healthy tissue samples were collected from individuals at low concentrations of acid (8% O2), normal acid (20% O2) and high concentrations of acid (80% O2) for 2 hours. The expression of metabolic related factors and RNA-seq was quantitatively evaluated by RT-PCR. As a result, the expression of Dnmt3 α, Mbd 2, Mbd 3, and Hdac 2 in lung tissue was intentionally increased after stimulation with low concentrations of acid, and the expression of Dnmt1 and Dnmt3 α in lung tissue was intentionally decreased. The expression of correlation factors in lung tissue was detected at high concentrations. The results of the paper are now submitted. A party, heart organization, RNA-seq analysis, etc. The detailed analysis of the results is in progress. 2. Tissue culture of lower limb tissue and cell culture of lower limb tissue and cell culture of lower limb tissue The improved culture method of healthy lower limb muscle tissue was successfully used to culture the muscle tissue for several months. Culture, preservation, and recovery of cells In addition, the increase in cell culture, aging phenomenon, radiation exposure and acidification stimulation can be confirmed. The results of this paper are now in the process of submission (Revision).