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糸状菌の細胞表層動態を可視化する～新しい薬剤標的スクリーニング系の開発に向けて～

丝状真菌细胞表面动态可视化〜致力于开发新的药物靶标筛选系统〜

基本信息

批准号：
22K06600
负责人：
田中大
金额：
$ 2.66万
依托单位：
Tohoku Medical and Pharmaceutical University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2022
资助国家：
日本
起止时间：
2022-04-01 至 2025-03-31
项目状态：
未结题

项目摘要

令和４年度は、オーキシンデグロンシステムを利用したプロテインノックダウン実験系をAspergillus fumigatus に実装するための、技術基盤整備に着手した。特に、オーキシンデグロンの主要構成要素である OsTIR1 遺伝子を Aspergillus 属の恒常発現プロモーター PkpiA や誘導発現プロモーター PglaAの下流で制御するように発現ベクターを組換えつつ、OsTIR1 タンパク質をコードする塩基配列のコドン最適化を検討することで、Aspergillus 属真菌における TIR1 タンパク質発現レベルの改善に成功した。同時並行で、本菌のプロテインノックダウンのよりよい遺伝子標的を探す目的で、細胞壁ガラクトマンナン生合成にかかわる遺伝子を探していたところ、それぞれ独立にガラクトマンナン生合成を担う Mnt1、AnpAを同定し、査読付き英語論文誌にて報告した (Kadooka et al., Glycobiology, 2023; Kadooka et al., mSphere, 2023)。Mnt1は糖タンパク質型ガラクトマンナン、AnpAは糸状菌型コアマンナンの生合成に寄与していた。anpA遺伝子欠損株では、既知の cmsA 遺伝子欠損株と同じレベルでコアマンナン構造が高度に破壊されるが、cmsA遺伝子欠損株で見られるような高度の菌糸生育異常は観察されない。このことは、コアマンナン構造の破壊と糸状菌型生育が必ずしも相関しないことを示唆する。プロテインノックダウンの標的としてAnpAを試してみることで、コアマンナン構造と菌糸型生育の相関関係をより深く理解することができるだろう。

In 2004, the company started to develop a technical base for Aspergillus fumigatus. In particular, the main components of the system include OsTIR1 gene, Aspergillus constant occurrence, PkpiA induction, PglaA downstream control, OsTIR1 gene, PkpiA induction, PglaA downstream control, OsTIR1 gene, Aspergillus fungi, and Aspergillus. At the same time, the gene target of this strain is detected in parallel, and the gene target of cell wall is detected in parallel, and the gene target of cell wall is detected in parallel.(Kadooka et al., Glycobiology, 2023; Kadooka et al., mSphere, 2023)。Mnt1 is a sugar complex, and AnpA is a bacteria complex. The structure of anpA gene deficient strain is highly damaged, and cmsA gene deficient strain is highly damaged. The structure of this plant is related to the growth of bacteria. The relationship between structure and bacterial reproduction is deeply understood.