細胞の生死を制御するミトコンドリアと原形質膜のクロストーク機構の解明

阐明控制细胞生死的线粒体和质膜之间的串扰机制

• 批准号: 22K06827
• 负责人: 清水 貴浩
• 金额: $ 2.66万
• 依托单位: University of Toyama
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22K06827/
• 关键词: チャネル; ミトコンドリア; 蛋白質間相互作用; イオンチャネル; 原形質膜

容積感受性外向き整流性アニオンチャネル (VSOR) は、細胞の生死を制御するイオンチャネルである。これまでの予備的実験において、ミトコンドリアに発現しているswelling-sensitive molecule A (SSM-A：仮称) の発現量とVSOR機能が正の相関を示すだけでなく、VSORの機能発現における必須構成分子であり、原形質膜に発現しているleucine-rich repeat-containing 8A (LRRC8A) とSSM-Aとの近接がVSOR機能に必須であることを見出していることから、本年度は、これらの蛋白質間相互作用によるVSOR機能の制御機構について解明することを目的とした。まず、VSORの機能制御に必要なSSM-A領域を明らかにするため、VSOR活性に影響しない他のSSMアイソフォームとのキメラ体を作製した。いくつかのSSM-AのN末端キメラ体を過剰発現したヒト胎児腎臓HEK293T細胞では、VSOR電流のSSM-Aによる亢進が見られなくなった。また近接ライゲーションアッセイ法によりLRRC8AとSSM-Aとの近接を検討した結果、これらのSSM-Aキメラ体はLRRC8Aとの近接を示さなかった。一方、LRRC8AのC末端にあるleucine-rich repeat 領域を欠損させた変異体を作製したが、欠損変異体の発現が見られなかった。このため、leucine-rich repeat 領域の変異体を作製し、SSM-Aと相互作用するLRRC8Aの領域の検討を進めている。以上の結果から、VSORの機能制御にはSSM-AのN末端とLRRC8Aとの近接が重要であることが示唆された。本研究結果により、原形質膜とミトコンドリアのクロストーク機構に必須となる蛋白質間相互作用について明らかにできた。

Volume sensitivity outward rectifier failure (VSOR), cell death control failure This is a prepared swelling-sensitive molecule A.(SSM-A： The expression of SSM-A and VSOR function are positively correlated. The expression of VSOR function must be composed of molecules. The expression of SSM-A and VSOR function must be composed of leucine-rich repeat-containing 8A (LRRC8A). The expression of SSM-A and VSOR function must be composed of molecules. The expression of SSM-A and VSOR function must be composed of molecules. The expression of SSM-A and VSOR function must be composed of molecules. The expression of SSM-A and VSOR function must be composed of molecules. The purpose of this protein interaction is to clarify the regulatory mechanism of VSOR function. The SSM-A domain is required for functional control, and the SSM-A domain is required for functional control. The N-terminal phase transition of SSM-A was observed in HEK293T cells, and the VSOR current was increased in SSM-A. The proximity test results for LRC8A and SSM-A show that LRC8A and SSM-A are not close to each other. A party, LRRC8A C terminal, leucine-rich repeat field, loss of foreign language, loss of language, loss of language The study of LRRC8A domain in the context of SSM-A interaction As a result, the functional control of VSOR is important for the N-terminal of SSM-A and the proximity of LRRC8A. The results of this study indicate that protoplasma membrane is essential for protein-protein interactions.

项目成果

容積感受性アニオンチャネル機能における膜蛋白質複合体形成の役割.

膜蛋白复合物形成在体积敏感阴离子通道功能中的作用。

• 发表时间: 2022
• 作者: 石川めぐみ;清水貴浩;藤井拓人;酒井秀紀.
• 通讯作者: 酒井秀紀.

TRPV1チャネルのホスホイノシタイドによる制御機構.

磷酸肌醇对 TRPV1 通道的调节机制。

• 发表时间: 2022
• 作者: 清水貴浩;柳瀬宜広;藤井拓人;榊原陽香;酒井秀紀.
• 通讯作者: 酒井秀紀.

単分子測定法によるヒト TMEM16F の機能解析.

使用单分子测定对人 TMEM16F 进行功能分析。

• 发表时间: 2022
• 作者: 影山哲平;櫻井大雅;清水貴浩;中尾裕之;岩本真幸;藤井拓人;永森收志;中野実;老木成稔;酒井秀紀.
• 通讯作者: 酒井秀紀.

Activation of mouse Otop3 proton channels by Zn2+

Zn2 激活小鼠 Otop3 质子通道

• DOI: 10.1016/j.bbrc.2023.03.066
• 发表时间: 2023
• 期刊: Biochemical and Biophysical Research Communications
• 影响因子: 3.1
• 作者: Fujii Takuto;Shimizu Takahiro;Kaji Yukino;Katoh Mizuki;Sakai Hideki
• 通讯作者: Sakai Hideki

The role of hydrophilic subunit cavity in the function of transmembrane protein 16F.

亲水亚基腔在跨膜蛋白16F功能中的作用。

• 发表时间: 2023
• 作者: 清水貴浩;白井佳暖;鍋島彰太;藤井拓人;酒井秀紀.
• 通讯作者: 酒井秀紀.