細胞容積調節機構に関わる非選択性カチオンチャネルの分子同定と細胞死への役割

参与细胞体积调节的非选择性阳离子通道的分子鉴定及其在细胞死亡中的作用

• 批准号: 17790156
• 负责人: 清水 貴浩
• 金额: $ 2.18万
• 依托单位: National Institute for Physiological Sciences
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• 财政年份: 2005
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2005 至 2006
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-17790156/
• 关键词: イオンチャネル; 細胞容積; カチオン; RVD

細胞容積調節機構は、細胞が生存するために必要不可欠な機能である。Ca^<2+>透過性非選択性カチオンチャネルは、これまでに細胞膨張後の調節性容積減少(Regulatory Volume decrease : RVD)の初期過程に重要であることが明らかとなっているが、そのチャネルの性質についてはほとんど知られていなかった。それ故に本研究で電気生理学的に検討したところ、ヒト子宮頸部上皮HeLa細胞に膜伸展や細胞膨張により活性化されるCa^<2+>透過性非選択性カチオンチャネルを見いだした。またこのチャネルはMg^<2+>も透過する一方で、細胞内外のMg^<2+>により抑制される特異なチャネルであることが明らかとなった。薬理学的には膜伸展により活性化されるカチオンチャネルの阻害剤と言われているGd^<3+>、あるいは非選択性カチオンチャネルファミリーであるTransient Receptor Potential(TRP)チャネルの阻害剤であるSKF96365およびruthenium redに感受性であった。さらにコールターカウンター法を用いて、これら阻害剤がRVDを抑制することを明らかにした。これらの結果からTRPチャネルが分子候補であることが示唆されたので、RT-PCR法でmRNAを確認したところ、TRPM7が候補分子であることが示唆された。この可能性を検討するために、RNAi法を用いた。siRNAによるTRPM7発現抑制細胞において、これら膜伸展および細胞膨張により活性化されるカチオン電流は消失し、RVDも抑制された。それ故に、TRPM7チャネルがRVDに関わるCa^<2+>透過性カチオンチャネル分子であることが明らかとなった。またこれまでにこのチャネルが、ある種の細胞死に関与することも明らかにしている。この詳細な検討を次年度に行いたい。

Cell volume regulation mechanisms are essential for cell survival. Ca^<2+> Permeability non-selective CCR, CCR, CCR. Therefore, in this study, the electrophysiological characteristics of HeLa cells were studied. The membrane expansion and cell expansion of HeLa cells were activated by Ca^<2+> permeability and non-selective cell growth. The Mg^<2 +> in and out of the cell is inhibited by the Mg^<2+> in the cell. The chemical resistance to membrane extension is expressed as Gd^<3+>, non-selective Receptor Potential(TRP) and ruthenium red sensitivity. It is now clear that the U-TECH method can be used to suppress RVD with these inhibitors. The results of this study were as follows: TRP, mRNA, TRPM7, candidate molecules. This possibility is discussed in detail in the context of RNAi. siRNA TRPM7 inhibits cell growth, membrane expansion, and cell expansion. Therefore, TRPM7 is the key to RVD. Ca^<2+> is transparent. This is the first time I've ever seen a child. This is a detailed review of the next year's events.