軸索変性誘導分子SARM1の活性・分解制御によるパーキンソン病治療法の開発

通过控制 SARM1（一种诱导轴突变性的分子）的活性和降解来开发帕金森病的治疗方法

基本信息

批准号：
22K06884
负责人：
村田等
金额：
$ 2.66万
依托单位：
Okayama University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2022
资助国家：
日本
起止时间：
2022-04-01 至 2025-03-31
项目状态：
未结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22K06884/
关键词：
SARM1 軸索変性 NAD パーキンソン病ミトコンドリア

项目摘要

細胞のエネルギー代謝に重要なNADを消費し、神経軸索変性を惹き起こすSARM1の活性・分解制御に関する研究を行っている。当該年度は独自の化合物スクリーニングから見出したSARM1阻害化合物（化合物X）を用いて解析を行った。化合物Xはin vitroでSARM1のNAD分解活性を顕著に抑制した。ヒトiPS細胞から分化誘導した神経細胞に対してパーキンソン病様の症状を誘発することが知られているロテノンを添加すると、神経突起分解や細胞死が誘導される。ここに化合物Xを添加すると、ロテノン曝露によって誘導されるNADやATPの減少が抑制され、神経突起分解や細胞死の割合も大幅に減少した。またSARM1の発現を抑制した神経細胞においても同様の結果を得ることができた。SARM1はある環境下におくと、細胞内で分解されていくことを見出した。当該年度はこの分解に関与するSARM1内のアミノ酸配列を特定するために、種々のSARM1変異体発現ベクターを構築し解析を行った。現在、SARM1分解に関与するドメイン候補を見つけており、更にドメイン内のアミノ酸配列の絞り込みを行っている段階である。引き続き解析を続け、SARM1分解に重要なアミノ酸配列および分解酵素の特定につなげたい。SARM1阻害によるパーキンソン病の治療効果を確認するために、ロテノン投与パーキンソン病モデルマウスを用いた解析を行っている。当該年度は化合物Xの投与条件を検討しており、腹腔内投与や経口投与を行い、マウスの状態を確認している。投与条件を定め、ロテノンによって誘導される神経変性に対するSARM1阻害効果の影響を解析していく予定である。

我们正在对SARM1的活性和降解进行研究，SARM1消耗了NAD，这对于细胞能量代谢很重要，并引起神经乳头退化。在今年，使用我们自己的化合物筛选发现的SARM1抑制剂化合物（化合物X）进行了分析。化合物X在体外显着抑制了SARM1的NAD降解活性。添加烤面包酮，已知会诱导帕金森氏病的症状到神经元引起与人IPS细胞的分化，从而诱导神经突降解和细胞死亡。此处的化合物X添加抑制了烤面包酮暴露引起的NAD和ATP的降低，并且显着降低了神经突降解和细胞死亡的速率。对于抑制SARM1表达的神经元也获得了相似的结果。有人发现，将SARM1放置在某个环境中时会在细胞内降解。在今年，构建并分析了各种SARM1突变体表达载体，以鉴定SARM1中涉及该降解的氨基酸序列。目前，我们发现候选域涉及SARM1降解，并进一步缩小了域内的氨基酸序列。我们想继续进行分析，并有助于鉴定对SARM1降解很重要的氨基酸序列和降解酶。为了确认SARM1抑制帕金森氏病的治疗作用，使用烤面包酮的帕金森氏病小鼠进行了分析。在今年，检查了化合物X的给药条件，并通过腹膜内给药或口服给药证实了小鼠的状况。将确定给药条件，并将分析SARM1抑制作用对紫藤酮诱导的神经变性的影响。