原虫におけるミリストイル化タンパク質の輸送メカニズムの解明

阐明原生动物中肉豆蔻酰化蛋白的转运机制

• 批准号: 22K07050
• 负责人: 中野 由美子
• 金额: $ 2.66万
• 依托单位: National Institute of Infectious Diseases
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22K07050/
• 关键词: 赤痢アメーバ; Rab GTPase; メンブレントラフィック; membrane traffic; protozoa

病原体の細胞表面タンパク質は、宿主認識や組織への侵入に関与する。一般的に分泌タンパク質にはN末端にシグナルペプチドが存在し、小胞を介して細胞外に分泌される。しかし、シグナルペプチド非依存型の分泌タンパク質も病原体や宿主細胞で報告されている。申請者は、赤痢アメーバの100種以上に多様化したRab GTPaseのうち、Rab2 isotypeがC末端ではなくN末端に脂質修飾を受ける可能性があることを見出しており、Rab2 isotypeの輸送の特殊性を明らかにすることが目的とする。赤痢アメーバのRab2ファミリーは3つのアイソタイプから構成される。EhRab2Aは785, EhRab2Bは214,EhRab2Cは232アミノ酸残基である。RNAseq解析を行うと、EhRab2Aの発現は非常に低く、EhRab2BとEhRab2Cの発現は低いものの、栄養体での発現が確認された。ゲノムデータベース情報では、いずれも転写開始メチオニンの直後にイントロンが存在している。特にEhRab2AはN末端にkinase domainが融合して発現しているのが観察された。EhRab2AとEhRab2Bは赤痢アメーバとその近縁種E. nuttaliあるいはE. moshkovskiiに存在するが、EhRab2Cは系統的に離れたE. invadensには存在せず、哺乳動物に特異的なEntamoeba に存在していると考えられた。またEhRab2CはN末端に疎水性の伸長配列が存在した。EhRab2ファミリーにはC末にシステイン残基はなく、N末にシステインが２つ存在する。このN末のシステインはSパルミトイル化されることを複数の予測モデルで確認した。EhRab2Bがパルミトイル化されるなら、膜に局在が確認できると考え、EhRab2B-GFP融合を発現する形質転換アメーバ株を作成したところ、GFPの局在は可溶性画分に観察された。融合したGFPの分子量が大きく、EhRab2Bの膜局在に阻害的に作用したことを考慮し、浸水性で小さなFLAGタグを融合することを試みている。

The pathogen is present on the cell surface in the タ, パ, パ, and the host recognizes the や tissue in the へ. The pathogen invents the に and する. General に secretion タ ン パ ク qualitative に は N terminal に シ グ ナ ル ペ プ チ ド が し, vesicular を interface し て secretion of extracellular に さ れ る. <s:1> パ ペプチド, シグナ ペプチド ペプチド ペプチド reports of non-dependent secretory タ <e:1> パ <s:1> germ <s:1> pathogen や host cell で されて されて る る る. Applicants は, dysentery ア メ ー バ の more than more than 100 kinds of に others turn し た Rab GTPase の う ち, Rab2 isotype が C terminal で は な く N terminal に lipid modification を by け る possibility が あ る こ と を shows し て お り, Rab2 The particularity of isotype <s:1> conveying <e:1> を clarity ら とが にする とが とが purpose とする. Dysentery ア メ ー バ の Rab2 フ ァ ミ リ ー は 3 つ の ア イ ソ タ イ プ か ら constitute さ れ る. EhRab2A ノ 785, EhRab2B ノ 214,EhRab2C である 232ア ノ ノ acid residue である. RNAseq parsing line を う と, EhRab2A の 発 は now very low に く, EhRab2B と EhRab2C の 発 now は low い も の の, tech students.their ownship keep で の 発 が now confirmed さ れ た. ゲ ノ ム デ ー タ ベ ー ス intelligence で は, い ず れ も planning to write start メ チ オ ニ ン の straight after に イ ン ト ロ ン が exist し て い る. The にEhRab2A <s:1> n-terminal にkinase domainが fusion <s:1> て occurrence る て る る が観 が観 observation された. EhRab2A と EhRab2B は dysentery ア メ ー バ と そ の about try species e. nuttali あ る い は e. moshkovskii に exist す る が, EhRab2C に は system from れ た e. invadens に は exist せ ず, mammals に specific な Entamoeba Youdaoplaceholder0 exists in the て ると ると examination えられた. Youdaoplaceholder0 EhRab2C また n-terminal に疎 aqueous <s:1> elongation configuration が exists た た. EhRab2ファ ファ リ に に に する にシステ <s:1> <s:1> なく なく なく at the end of C and にシステ にシステ が が2 が at the end of N exist する. <s:1> <s:1> the last <s:1> of N システ the <s:1> パ Sパ the パ ト the ト the ト the される the される とを the とを the complex number <e:1> is pretested モデ the で confirms the た. EhRab2B が パ ル ミ ト イ ル change さ れ る な ら, membrane in が に bureau confirmed で き る と え test, EhRab2B - GFP fusion を 発 now す る form quality planning in ア メ ー バ strains を made し た と こ ろ, GFP の innings in soluble painting は に 観 examine さ れ た. Fusion し た GFP の が large molecular weight き く, EhRab2B の film bureau in に resistance against the に し た こ と を し, flooding で small さ な FLAG タ グ を fusion す る こ と を try み て い る.

项目成果

赤痢アメーバにおける膜輸送の多様化とアメーバ性肝膿瘍形成に必要なトランスゴルジ輸送を制御するArfX2 GTPaseの役割

ArfX2 GTPase 在调节溶组织内阿米巴膜运输多样化和阿米巴肝脓肿形成所需的跨高尔基体转运中的作用

• 发表时间: 2023
• 作者: 中野 由美子;牧内 貴志;栃倉 麻美;津久井 久美子;Carol A. Gilchrist;William A. Petri Jr;野崎 智義
• 通讯作者: 野崎 智義

Prevalence and metronidazole resistance of Trichomonas vaginalis among Japanese women in 2021

• DOI: 10.1016/j.ijregi.2023.02.007
• 发表时间: 2023-06-01
• 期刊: IJID REGIONS
• 作者: Saito-Nakano, Yumiko;Umeki, Yuko;Hisaeda, Hajime
• 通讯作者: Hisaeda, Hajime