脊髄損傷におけるKLK8- NRG1- ErbBシグナルの作用機序

KLK8-NRG1-ErbB信号在脊髓损伤中的作用机制

• 批准号: 22K07358
• 负责人: 中澤 瞳
• 金额: $ 2.66万
• 依托单位: Kanazawa Medical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22K07358/
• 关键词: 脊髄損傷; ErbB; グリア; NRG1; KLK

カリクレイン関連プロテアーゼ8（KLK8）は、細胞外の基質を切断・遊離させ、下流シグナルを活性化する細胞外プロテアーゼである。KLK8は脊髄損傷時にオリゴデンドロサイトにおいて発現が上昇し、オリゴデンドロサイト細胞死および脱髄を誘導することが見出されているが、その作用機序は不明であった。私は、KLK8により切断される基質の一つである神経栄養因子・Neuregulin1(NRG1)の受容体であるErbB受容体が脊髄損傷部において発現上昇する（mRNAレベル）ことを見出している。この研究では、脊髄損傷時におけるKLK8-NRG1-ErbBシグナルの亢進がいかにしてオリゴデンドロサイトの細胞死と脱髄に関わるか、そのメカニズムの全容の解明に迫る目的で行われた。今年度はErbBシグナルの亢進を確認するため、下流分子のリン酸化をウェスタンブロットにより調べたところ、脊髄損傷による下流分子のリン酸化レベルの上昇が認められた。また、一部ErbB受容体の蛋白質レベルにおける発現上昇、およびリン酸化レベルの上昇が認められた。また、一部のErbB受容体はプロセシングを受けている可能性を示唆するデータが得られているため、現在、プロセシングの有無についても解析を進めている。また、NRG1、ErbB受容体発現細胞の組織内分布を解析するためにin situ hybridizationで使用するプローブの作製を行った。当初、設計していたプローブは検出感度が低かったため、多数のプローブの試作を行う必要が生じた。最終的に、通常組織において特異的なシグナルを検出できるプローブの作製を確認し、現在、脊髄損傷組織における発現細胞の解析を進めている。

KLK-8 is an extracellular matrix that is cleaved, dissociated, and activated. KLK8 has been shown to increase in the number of cell death and apoptosis during spinal cord injury, and its mechanism of action is unknown. The receptor of neurotrophic factor Neuregulin1(NRG1) was found to increase in the receptor of ErbB in the spinal injury region. This study aims to investigate the effects of KLK8-NRG1-ErbB on cell death and apoptosis during spinal cord injury. This year, the increase of ErbB and the increase of downstream molecular acidification were confirmed. The protein level of some ErbB receptors increased, and the protein level of some ErbB receptors increased. A part of ErbB receptor can be used to analyze the possibility of the occurrence of the disease. Analysis of tissue distribution of NRG1 and ErbB receptor cells in situ hybridization At the beginning, the design was very sensitive, and most of the trials were necessary. Finally, the analysis of specific tissue types, including the identification of the mechanism for the development of cells, and the analysis of the present, spinal injury tissue types, is performed.