遺伝性血栓症の病因（オミックス解析）と病態の解明

阐明遗传性​​血栓形成的病因（组学分析）和病理学

• 批准号: 22K07391
• 负责人: 森下 英理子
• 金额: $ 2.66万
• 依托单位: Kanazawa University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22K07391/
• 关键词: 遺伝性血栓症; アンチトロンビン（AT）欠乏症; プロテインC(PC)欠乏症; プロテインS（PS）欠乏症; パネル検査; ノックアウトゼブラフィッシュ; 静脈血栓塞栓症; VTE

①静脈血栓塞栓症（VTE）のリスク因子の一つである遺伝性血栓症においては、遺伝子バリアントの同定率はアンチトロンビン（AT）欠乏症約9割、プロテインC(PC)欠乏症5割、プロテインS（PS）欠乏症にいたっては3～4割程度である。このように、バリアントの同定率は標的遺伝子で異なり、原因不明も100例近くあり、現行法のDNA解析では確定診断に限界がある。そこで、遺伝性血栓症の病因解明のために、血栓性素因関連遺伝子群のNGSパネルを用いた遺伝子バリアントの同定、さらには標的遺伝子のRNAを用いたトランスクリプトーム解析や網羅的なプロテオーム解析を組み合わせたオミックス解析による検査法を確立することを目的とした。②当研究室では、全国から遺伝性血栓性素因の遺伝子解析の依頼があり、新規バリアントが発見された場合は、そのバリアントの遺伝子組換え蛋白を作成し、機能低下をきたす機序について解析を行なっている。特に、活性化PC抵抗性（APCR）を示す第V因子(FV)異常症であるFV Y1964Cのリン脂質結合障害を解析するために、Liposome flotation assayの実験系を構築する。凝固反応は全てリン脂質二重膜上で起こるが、これまでに脂質二重膜を形成して凝固因子との結合実験を行った報告は皆無である。ネイティブに限りなく近い脂質二重膜と凝固因子の結合を直接検出するアッセイ系を構築されると、これまで解明されてこなかった凝固因子と生体膜の結合メカニズムの理解が大幅に進むことが期待される。③AT欠乏症ホモ接合体は胎内致死をきたすため、マウスなどの哺乳類モデルによって解析することは困難である。そこで、初期胚が透明で生きたまま簡便に組織観察を行うことができるゼブラフィッシュを用いることで胎内致死変異の病態を解析するための新規ツールを開発する。

1）在遗传性血栓形成中，是静脉血栓形成（VTE）的危险因素之一，基因变异的识别率约为90％，这是由于缺乏症（AT）缺乏症，蛋白C（PC）缺乏症和30％由于蛋白质S（PS）缺乏症而导致的30％。因此，变体的识别率取决于目标基因，并且有近100例未知病例，并且当前的DNA分析具有有限的确定性诊断。因此，为了阐明遗传性​​血栓形成的发病机理，目的是使用NGS倾斜易感性相关基因组鉴定基因变异，以及使用靶基因RNA和全面蛋白质组分析结合转录组分析的OMIC分析。 ②我们的实验室收到来自全国各地的要求，分析遗传性血栓性易感性的遗传易感性，当发现新变体时，它会为该变体创建转基因蛋白质，并分析导致功能下降的机制。特别是，我们构建了脂质体浮选测定法的实验系统，以分析FV Y1964C的磷脂结合障碍，这是一种因子V（FV）功能障碍，表现出激活的PC抗性（APCR）。所有凝血反应都发生在磷脂双层上，但尚未提出任何形成脂质双层以结合凝血因子的报道。当构建一个直接检测脂质双层膜和尽可能接近本地人的凝结因子的结合的测定系统时，预计将大大改善对凝结因子和生物膜之间不清楚的结合机制的理解。 3）由于AT缺乏症的纯合子在胎儿区域导致死亡，因此很难使用诸如小鼠的哺乳动物模型来分析它们。因此，开发了一种新工具来通过使用斑马鱼来分析胎儿致命突变的病理，该斑马鱼可以轻松地观察到早期胚胎透明且活着的同时。

项目成果

血液疾患最新の治療2023-2025（分担執筆）

2023-2025年血液疾病最新治疗方法（合著者）

• 发表时间: 2022
• 作者: 松村到;張替秀郎;神田善伸
• 通讯作者: 神田善伸

生活習慣と可溶型C-type Lectin-like Receptor値の関連

生活习惯与可溶性C型凝集素样受体水平的关系

• 发表时间: 2022
• 作者: 神尾成美;山口孝一;本間喜美子;川村雅英;松下周平;長屋聡美;森下英理子
• 通讯作者: 森下英理子

Identification and functional analysis of three novel genetic variants resulting in premature termination codons in three unrelated patients with hereditary antithrombin deficiency

导致三名无关的遗传性抗凝血酶缺乏症患者过早终止密码子的三种新遗传变异的鉴定和功能分析

• DOI: 10.1007/s12185-022-03509-3
• 发表时间: 2022
• 期刊: International Journal of Hematology
• 影响因子: 2.1
• 作者: Imai Yuta;Nagaya Satomi;Araiso Yuhei;Meguro-Horike Makiko;Togashi Tomoki;Ohmori Kensho;Makita Yuka;Sato Eiichi;Yujiri Toshiaki;Nagamori Yuta;Horike Shin-ichi;Watanabe Atsushi;Morishita Eriko
• 通讯作者: Morishita Eriko

遺伝性プロテインC欠乏症2症例に同定された2つの新規遺伝子変異

在两例遗传性蛋白 C 缺乏症病例中发现了两种新的基因突变

• 发表时间: 2022
• 作者: 大森健聖;長屋聡美;冨樫朋貴;上田凌央;森屋羽瑠雅;目黒牧子;今井湧太;牧田友香;石束光司;松添弘樹;堀家慎一;森下英理子
• 通讯作者: 森下英理子

Factor V Leiden-independent activated protein C resistance: Communication from the plasma coagulation inhibitors subcommittee of the International Society on Thrombosis and Haemostasis Scientific and Standardisation Committee

• DOI: 10.1016/j.jtha.2022.10.014
• 发表时间: 2023-01-10
• 期刊: JOURNAL OF THROMBOSIS AND HAEMOSTASIS
• 影响因子: 10.4
• 作者: Moore, Gary W.;Castoldi, Elisabetta;Adcock, Dorothy M.
• 通讯作者: Adcock, Dorothy M.