Functional analysis of miRNA in anti-cancer drug-resistance of hepatocellular carcinoma
miRNA在肝细胞癌抗癌耐药中的功能分析
基本信息
- 批准号:22K07473
- 负责人:
- 金额:$ 2.66万
- 依托单位:
- 依托单位国家:日本
- 项目类别:Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
- 财政年份:2022
- 资助国家:日本
- 起止时间:2022-04-01 至 2025-03-31
- 项目状态:未结题
- 来源:
- 关键词:
项目摘要
1) カボザンチニブがレンバチニブ耐性肝がん細胞に対して有効であることを動物実験で検証した.レンバチニブ耐性肝がん細胞株をマウスの皮下に移植し,カボザンチニブをマウスに経口投与した.その結果,カボザンチニブを投与した群においては,対照群に比べて,皮下に移植したレンバチニブ耐性肝がん細胞の成長が抑制された.2) 次に,カボザンチニブの薬効に関連するタンパク質及びmicroRNAの同定を試みた.マウスの皮下から腫瘍を取り出して,腫瘍に含まれるたんぱく質の発現をプロテオーム解析にて網羅的に解析した.また,タンパク質の発現を制御する分子であるmicroRNAについても,microarrayを用いて網羅的に解析した.その結果,カボザンチニブ投与群と対照群の比較において,統計学的に有意に発現が異なるタンパク質48分子とmicroRNA 10分子をそれぞれ同定した.同定されたタンパク質の発現が,同じく同定されたmicroRNAによって制御されている可能性について,microRNAのデータベース(miRDB)を用いて検索した.その結果,同定されたmicroRNAとタンパク質の間には,直接的な反応(microRNAがmessanger RNAの3'末に結合すること)は無いものと予測された.3) カボザンチニブの薬効に関連するmicroRNAについて,腫瘍の増殖を抑制する作用を検証した.同定されたmicroRNAをレンバチニブ耐性肝がん細胞に取り込ませた(Lipofectamineによるtransfection).また逆に,同定されたmicroRNAの阻害物質 (miRNA inhibitor)を同様にレンバチニブ耐性肝がん細胞に取り込ませた.その結果,レンバチニブ耐性肝がん細胞において発現の増加していたmicroRNAは,腫瘍の増殖を抑制しないことが分かった.
1) カ ボ ザ ン チ ニ ブ が レ ン バ チ ニ ブ patient liver が ん cells に し seaborne て have sharper で あ る こ と を animals be 験 で 検 card し た. レ ン バ チ ニ ブ patient liver が ん cell lines を マ ウ ス の subcutaneous し に transplantation, カ ボ ザ ン チ ニ ブ を マ ウ ス に 経 mouth cast with し た. そ の results, カ ボ ザ ン チ ニ ブ を cast with し た group に お い て は, according to the group of seaborne に than べ て, subcutaneous に transplantation し た レ ン バ チ ニ ブ patient liver が の が growth inhibition さ ん cells れ た. 2) に, カ ボ ザ ン チ ニ ブ の 薬 unseen に masato even す る タ ン パ ク qualitative and び mirnas の be を try み た. マ ウ ス の subcutaneous か ら swollen sores を take り out し て, swollen sores に containing ま れ る た ん ぱ く qualitative の 発 now を プ ロ テ オ ー ム parsing に て snare に resolution し た. ま た, タ ン パ ク qualitative の 発 now を suppression す る molecular で あ る mirnas に つ い て も, microarray を with い て snare に resolution し た. そ の results, カ ボ ザ ン チ ニ と ブ cast with group according to the group of seaborne の is に お い て, statistical に intentionally に 発 different showing が な る タ ン パ ク 48 molecular mass と mirnas 10 molecular を そ れ ぞ れ with fixed し た. With fixed さ れ た タ ン パ ク qualitative の 発 が now, with じ く with fixed さ れ た mirnas に よ っ て suppression さ れ て い る possibility に つ い て, mirna の デ ー タ ベ ー ス (miRDB) を い て 検 cable し た. そ の results, with fixed さ れ た mirnas と タ ン パ ク between qualitative の に は, direct な anti 応 (mirna が messanger RNA の 3 'end に combining す る こ と) は no い も の と be さ れ た. 3) カ ボ ザ ン チ ニ ブ の 薬 unseen に masato even す る mirnas に つ い て, swollen sores の raised colonization を inhibit す る role を 検 card し た. With constant さ れ た mirnas を レ ン バ チ ニ ブ patient liver が に ん cells take り 込 ま せ た (Lipofectamine に よ る transfection). ま た inverse に, with fixed さ れ た mirnas の resistance against material (miRNA) inhibitor を with others に レ ン バ チ ニ ブ patient liver が に ん cells take り 込 ま せ た. そ の results, レ ン バ チ ニ ブ patient liver が ん cells に お い て 発 now の raised し て い た mirnas は, swollen sores の raised colonization を inhibit し な い こ と が points か っ た.
项目成果
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