Functional analysis of miRNA in anti-cancer drug-resistance of hepatocellular carcinoma

miRNA在肝细胞癌抗癌耐药中的功能分析

• 批准号: 22K07473
• 负责人: 藤田 浩二
• 金额: $ 2.66万
• 依托单位: Kagawa University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22K07473/
• 关键词: プロテオーム解析; Microarray; 耐性; 肝細胞癌; 薬剤耐性; miRNA

1) カボザンチニブがレンバチニブ耐性肝がん細胞に対して有効であることを動物実験で検証した．レンバチニブ耐性肝がん細胞株をマウスの皮下に移植し，カボザンチニブをマウスに経口投与した．その結果，カボザンチニブを投与した群においては，対照群に比べて，皮下に移植したレンバチニブ耐性肝がん細胞の成長が抑制された．2) 次に，カボザンチニブの薬効に関連するタンパク質及びmicroRNAの同定を試みた．マウスの皮下から腫瘍を取り出して，腫瘍に含まれるたんぱく質の発現をプロテオーム解析にて網羅的に解析した．また，タンパク質の発現を制御する分子であるmicroRNAについても，microarrayを用いて網羅的に解析した．その結果，カボザンチニブ投与群と対照群の比較において，統計学的に有意に発現が異なるタンパク質48分子とmicroRNA 10分子をそれぞれ同定した．同定されたタンパク質の発現が，同じく同定されたmicroRNAによって制御されている可能性について，microRNAのデータベース(miRDB)を用いて検索した．その結果，同定されたmicroRNAとタンパク質の間には，直接的な反応(microRNAがmessanger RNAの3'末に結合すること)は無いものと予測された．3) カボザンチニブの薬効に関連するmicroRNAについて，腫瘍の増殖を抑制する作用を検証した．同定されたmicroRNAをレンバチニブ耐性肝がん細胞に取り込ませた(Lipofectamineによるtransfection)．また逆に，同定されたmicroRNAの阻害物質 (miRNA inhibitor)を同様にレンバチニブ耐性肝がん細胞に取り込ませた．その結果，レンバチニブ耐性肝がん細胞において発現の増加していたmicroRNAは，腫瘍の増殖を抑制しないことが分かった．

1)The animal is the most vulnerable to disease. The cell lines were transplanted subcutaneously, and the cell lines were injected subcutaneously. The results showed that the growth of resistant liver cells was inhibited by subcutaneous transplantation, and the identification of microRNA was also tested. The skin of the tumor is extracted from the tumor, and the tumor is analyzed. The microRNA is used to control the molecular expression of DNA. The results show that the statistical analysis of microRNA is consistent with the statistical analysis of microRNA. The same is true for microRNA detection, microRNA detection, and microRNA detection (miRDB). The results showed that the microRNA was closely related to the proliferation of tumor cells, and the direct reaction (microRNA and messenger RNA binding) was not detected. The same is true for microRNA, which can be transferred to resistant liver cells. The same is true for miRNA inhibitors. The same is true for resistant liver cells. As a result, microRNA expression in resistant liver cells increased and tumor growth was inhibited.