Establishment of biomarkers and elucidation of pathophysiology for coronary artery lesions of Kawasaki disease

重篤な合併症として冠動脈病変(coronary artery lesions: CALs)を残す川崎病は、病因や病態が未だに明らかでない小児期発症で最も多い血管炎症候群である。川崎病に合併するCALsは小児の後天性心疾患の死亡原因第一位であり、死亡に至らなくともCALsの残存は、児のQOLを損ない、成人期の冠動脈疾患合併の高リスク群となるため、CALsの発生に関連するタンパク質を同定し病態メカニズムを解明する。血清は、最も簡単に診断や病勢を測定できるサンプルだが、アルブミンなど夾雑物が大量に含まれるために未知の分子を探索する網羅的解析には不利だった。タンパク質の網羅的解析（プロテオミクス）は診断解析に有利な理想的サンプル（リキッドバイオプシー）とみなされることから、新規バイオマーカーの同定を試みた。CALs 症例にてDIA(data independent acquisition)法を用いた次世代プロテオミクス（Q Exactive HF）で解析して症例の蓄積を図る。DIA 法を用いると先行研究（Scientific report. 2017）で用いたDDA(data dependentacquisition)法では抽出できなかった低濃度のタンパク質を多数検体で詳細に検討することが可能である。タンパク質は川崎病と健常児で差がなく、CALs 症例のみで変動するものを3種類を選出した。選出したタンパク質を2種類をELISA 法で測定し、CALs で優位差があることを検証した。プロテオミクスで解析した初発の検体では、差が見られなかった。しかしながら、CALs症例では時間の経過とともに上昇していることが確認された。プロテオミクスとELISA測定に乖離があるため、これらのタンパク質がバイオマーカーとしての可能性はあるが、初診時においてもっとはっきり差の出る測定系を検討する必要性がある。

重篤な合併症として冠動脈病変(coronary artery lesions: CALs)を残す川崎病は、病因や病態が未だに明らかでない小児期発症で最も多い血管炎症候群である。川崎病に合併するCALsは小児の後天性心疾患の死亡原因第一位であり、死亡に至らなくともCALsの残存は、児のQOLを損ない、成人期の冠動脈疾患合併の高リスク群となるため、CALsの発生に関連するタンパク質を同定し病態メカニズムを解明する。血清は、最も簡単に診断や病勢を測定できるサンプルだが、アルブミンなど夾雑物が大量に含まれるために未知の分子を探索する網羅的解析には不利だった。タンパク質の網羅的解析（プロテオミクス）は診断解析に有利な理想的サンプル（リキッドバイオプシー）とみなされることから、新規バイオマーカーの同定を試みた。CALs 症例にてDIA(data independent acquisition)法を用いた次世代プロテオミクス（Q Exactive HF）で解析して症例の蓄積を図る。DIA 法を用いると先行研究（Scientific report. 2017）で用いたDDA(data dependentacquisition)法では抽出できなかった低濃度のタンパク質を多数検体で詳細に検討することが可能である。タンパク質は川崎病と健常児で差がなく、CALs 症例のみで変動するものを3種類を選出した。選出したタンパク質を2種類をELISA 法で測定し、CALs で優位差があることを検証した。プロテオミクスで解析した初発の検体では、差が見られなかった。しかしながら、CALs症例では時間の経過とともに上昇していることが確認された。プロテオミクスとELISA測定に乖離があるため、これらのタンパク質がバイオマーカーとしての可能性はあるが、初診時においてもっとはっきり差の出る測定系を検討する必要性がある。