Establishment of biomarkers and elucidation of pathophysiology for coronary artery lesions of Kawasaki disease

川崎病冠状动脉病变生物标志物的建立及病理生理学的阐明

基本信息

批准号：
22K07881
负责人：
成戸卓也
金额：
$ 2.5万
依托单位：
Kanagawa Children's Medical Center (Clinical Research Institute)
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2022
资助国家：
日本
起止时间：
2022-04-01 至 2025-03-31
项目状态：
未结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22K07881/
关键词：
川崎病川崎病冠動脈病変

项目摘要

重篤な合併症として冠動脈病変(coronary artery lesions: CALs)を残す川崎病は、病因や病態が未だに明らかでない小児期発症で最も多い血管炎症候群である。川崎病に合併するCALsは小児の後天性心疾患の死亡原因第一位であり、死亡に至らなくともCALsの残存は、児のQOLを損ない、成人期の冠動脈疾患合併の高リスク群となるため、CALsの発生に関連するタンパク質を同定し病態メカニズムを解明する。血清は、最も簡単に診断や病勢を測定できるサンプルだが、アルブミンなど夾雑物が大量に含まれるために未知の分子を探索する網羅的解析には不利だった。タンパク質の網羅的解析（プロテオミクス）は診断解析に有利な理想的サンプル（リキッドバイオプシー）とみなされることから、新規バイオマーカーの同定を試みた。CALs 症例にてDIA(data independent acquisition)法を用いた次世代プロテオミクス（Q Exactive HF）で解析して症例の蓄積を図る。DIA 法を用いると先行研究（Scientific report. 2017）で用いたDDA(data dependentacquisition)法では抽出できなかった低濃度のタンパク質を多数検体で詳細に検討することが可能である。タンパク質は川崎病と健常児で差がなく、CALs 症例のみで変動するものを3種類を選出した。選出したタンパク質を2種類をELISA 法で測定し、CALs で優位差があることを検証した。プロテオミクスで解析した初発の検体では、差が見られなかった。しかしながら、CALs症例では時間の経過とともに上昇していることが確認された。プロテオミクスとELISA測定に乖離があるため、これらのタンパク質がバイオマーカーとしての可能性はあるが、初診時においてもっとはっきり差の出る測定系を検討する必要性がある。

留下冠状动脉病变（CAL）的川崎病是童年时期最常见的血管炎综合症，在那里，发病机理和病理仍然未知。与川崎疾病相关的CAL是患有心脏病的儿童死亡的第一大原因，即使他们没有导致死亡，其余的CAL也会损害儿童的生活质量，并在成年期成为冠状动脉疾病的高风险群体。因此，将确定与CAL发展有关的蛋白质，并将阐明病理机制。血清是诊断和衡量疾病状态的最简单样本，但对于对未知分子的全面分析是不利的，因为它包含大量污染物，例如白蛋白。由于综合蛋白质分析（蛋白质组织）被认为是有利于诊断分析的理想样本（液体活检），因此我们试图鉴定新型的生物标志物。使用下一代蛋白质组学（Q Exprive HF）使用数据独立采集（DIA）方法来分析CAL，以累积病例。使用DIA方法，可以详细检查许多低浓度的蛋白质标本，这些标本无法使用先前研究中使用的DDA（数据依赖性获取）方法提取（ScientificReport。2017）。选择了三种类型的蛋白质，它们在川崎疾病和健康儿童之间有所不同，并且在CALS病例之间只有不同。使用ELISA方法测量了两种选定的蛋白质，以验证CAL的差异较高。在通过蛋白质组学分析的第一个样本中未观察到差异。但是，已经确认患者在CALS病例中随着时间的流逝而增加。由于蛋白质组学和ELISA测量之间的差异，因此这些蛋白质可能是生物标志物，但是有必要考虑一个测量系统，在初步咨询中会产生更独特的差异。