PHF6の翻訳後修飾を介した造血幹細胞制御

通过 PHF6 翻译后修饰调节造血干细胞

• 批准号: 22K08454
• 负责人: 宮城 聡
• 金额: $ 2.75万
• 依托单位: Shimane University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22K08454/
• 关键词: 造血幹細胞; クロマチンタンパク質; 白血病; クロマチン; エピジェネティクス; 遺伝子発現制御

PHD finger protein 6 (PHF6) 遺伝子の高頻度の機能欠失型変異が種々の造血器腫瘍で報告されている。我々は、Phf6がストレス造血時の造血幹細胞 (Hematopoietic stem cell; HSC) の機能抑制に働き、その欠損が HSC に競合優位性を付与することを報告した。我々は、PHF6の翻訳後修飾を介した機能制御を明らかにするために、BioID (proximity-dependent biotin identification)を行い、PHF6会合分子としてPHIPを同定した。PHIPはCullin-RING ligases 複合体 (CRLc) の基質受容体であり、モノユビキチン化を介してPHF6のクロマチンへのリクルートに関与する可能性が示唆される。本研究では、Phipの造血組織における機能解析を行うために、造血細胞特異的なPhip遺伝子欠損マウス(Vav1-iCre; Phipf/f　)を作成し、機能解析を行う。2-3ヶ月齢Vav1-iCre; Phipf/f　の造血組織をフローサイトメトリー (FCM) により解析した結果、明らかな造血異常は認められなかった。次に、長期間観察を行い、生後6ヶ月以降に進行性に血小板減少と脾腫が観察された。さらに、明らかな白血病は認められないものの、約20%のVav1-iCre; Phipf/f　が7から18ヶ月齢の間に死亡した。FCM解析の結果、骨髄と脾臓では造血幹・前駆細胞の増幅が認められた。これらの結果は、PHIP遺伝子の機能喪失が白血病発症に関与する可能性を示唆する。一方で、PHIP欠損がK562細胞の巨核球分化を著しく促進することを見出した。今後、この系を用いてPHIP遺伝子の分子レベルでの機能解析を行う予定である。

在多种造血肿瘤中，PHD手指蛋白6（PHF6）基因的突变高度缺陷。我们报告说，PHF6在抑制造血造血物质期间抑制造血干细胞（HSC）的功能，并且缺乏症在HSC中具有竞争优势。我们进行了接近依赖性生物素鉴定（Bioid），以识别PHIP为PHF6相关的分子，以通过翻译后修饰揭示功能调节。 PHIP是Cullin-Ring连接酶配合物（CRLC）的底物受体，表明它可能与单次素激素募集到染色质有关。在这项研究中，为了分析造血细胞特异性PHIP基因缺陷型小鼠（VAV1-ICRE; PHIPF/F）的PHIP功能，并进行了功能分析。 2-3个月大的Vav1-icre的造血组织；通过流式细胞仪（FCM）分析PHIPF/F，找不到明显的造血异常。接下来，进行长期观察，并在6个月大后观察到进行性血小板减少症和脾肿大。此外，尽管没有观察到明显的白血病，但约有20％的vav1-icre； PHIPF/F死于7至18个月大。 FCM分析显示，骨髓和脾脏中造血干和祖细胞的扩增。这些结果表明，PHIP基因中功能的丧失可能与白血病的发展有关。另一方面，我们发现PHIP缺乏症可显着促进K562细胞的巨核细胞分化。将来，将使用该系统对PHIP基因的功能分析进行。