PHF6の翻訳後修飾を介した造血幹細胞制御

通过 PHF6 翻译后修饰调节造血干细胞

• 批准号: 22K08454
• 负责人: 宮城 聡
• 金额: $ 2.75万
• 依托单位: Shimane University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22K08454/
• 关键词: 造血幹細胞; クロマチンタンパク質; 白血病; クロマチン; エピジェネティクス; 遺伝子発現制御

PHD finger protein 6 (PHF6) 遺伝子の高頻度の機能欠失型変異が種々の造血器腫瘍で報告されている。我々は、Phf6がストレス造血時の造血幹細胞 (Hematopoietic stem cell; HSC) の機能抑制に働き、その欠損が HSC に競合優位性を付与することを報告した。我々は、PHF6の翻訳後修飾を介した機能制御を明らかにするために、BioID (proximity-dependent biotin identification)を行い、PHF6会合分子としてPHIPを同定した。PHIPはCullin-RING ligases 複合体 (CRLc) の基質受容体であり、モノユビキチン化を介してPHF6のクロマチンへのリクルートに関与する可能性が示唆される。本研究では、Phipの造血組織における機能解析を行うために、造血細胞特異的なPhip遺伝子欠損マウス(Vav1-iCre; Phipf/f　)を作成し、機能解析を行う。2-3ヶ月齢Vav1-iCre; Phipf/f　の造血組織をフローサイトメトリー (FCM) により解析した結果、明らかな造血異常は認められなかった。次に、長期間観察を行い、生後6ヶ月以降に進行性に血小板減少と脾腫が観察された。さらに、明らかな白血病は認められないものの、約20%のVav1-iCre; Phipf/f　が7から18ヶ月齢の間に死亡した。FCM解析の結果、骨髄と脾臓では造血幹・前駆細胞の増幅が認められた。これらの結果は、PHIP遺伝子の機能喪失が白血病発症に関与する可能性を示唆する。一方で、PHIP欠損がK562細胞の巨核球分化を著しく促進することを見出した。今後、この系を用いてPHIP遺伝子の分子レベルでの機能解析を行う予定である。

High frequency and dysfunctional variant of PHD finger protein 6 (PHF6) gene has been reported in hematopoietic tumors. We report on functional inhibition of hematopoietic stem cells (HSC) in Hematopoietic cells (PHF6) and on the lack of competitive advantage of HSC. The function of PHF6 is controlled by the function of PHF6, and the function of PHF6 is controlled by the function of PHF6. PHIP has demonstrated the possibility of mediating the matrix receptor formation of Cullin-Ring ligases complex (CRLc) in PHF6. In this study, functional analysis of hematopoietic tissue of Phip was performed, and functional analysis of hematopoietic cell-specific Phip gene (Vav1-iCre; Phipf/f ) was performed. 2-3 Vav1-iCre; Phipf/f Hematopoietic Tissue The second, long-term observation, 6 months after birth progressive thrombocytopenia About 20% of Vav1-iCre; Phipf/f 7 - 18 months old FCM analysis results, bone marrow and spleen, hematopoietic stem cells and the increase in the amplitude of recognition These results suggest that loss of PHIP gene function may be associated with leukemia development. The differentiation of megakaryocytes in K562 cells was promoted by PHIP deficiency. In the future, this system will be used to analyze the molecular structure of PHIP gene.