Studies on novel HDL cholesterol efflux mechanisms

本研究課題では、HDLコレステロール受容体であるSR-BIの欠損により血漿中で上昇する遊離コレステロールの起源を調査する為に新しいアプローチを試みた。該当年度においてHDL-FC (高密度リポタンパク質中の遊離コレステロール) の放射性標識を評価し、HDL-CE から血中の FC への変換を決定するために、HDL の CE を放射性標識し（辻田）、マウスの血液に投与した（中須賀）。 放射性トレーサーのマウス尾側静脈への投与後 90 分で血漿サンプルを回収した。 本研究成果は、放射性標識 FC が野生型マウスと比較して SR-BI 欠損マウスで実際に増加していることを示しており、CE から FC への変換が血中で起こっているという考えを支持しています。またHDLの主要な構成タンパク質であるApoA-Iの本機構への寄与を評価する目的でApoA-IとSR-BIのダブルノックアウトマウスを作成しました。血漿リポタンパク質はゲルろ過HPLCでの評価（奥平）に加え、密度超遠心法で分離し、ネガティブ染色にて粒子径を測定（高瀬）し、遊離コレステロールを大量に含む大型HDLの出現を確認している。

本研究課題では、HDLコレステロール受容体であるSR-BIの欠損により血漿中で上昇する遊離コレステロールの起源を調査する為に新しいアプローチを試みた。該当年度においてHDL-FC (高密度リポタンパク質中の遊離コレステロール) の放射性標識を評価し、HDL-CE から血中の FC への変換を決定するために、HDL の CE を放射性標識し（辻田）、マウスの血液に投与した（中須賀）。 放射性トレーサーのマウス尾側静脈への投与後 90 分で血漿サンプルを回収した。 本研究成果は、放射性標識 FC が野生型マウスと比較して SR-BI 欠損マウスで実際に増加していることを示しており、CE から FC への変換が血中で起こっているという考えを支持しています。またHDLの主要な構成タンパク質であるApoA-Iの本機構への寄与を評価する目的でApoA-IとSR-BIのダブルノックアウトマウスを作成しました。血漿リポタンパク質はゲルろ過HPLCでの評価（奥平）に加え、密度超遠心法で分離し、ネガティブ染色にて粒子径を測定（高瀬）し、遊離コレステロールを大量に含む大型HDLの出現を確認している。