膵癌における低酸素応答性エレメントのターゲット遺伝子群の同定

胰腺癌缺氧反应元件靶基因的鉴定

• 批准号: 22K08797
• 负责人: 猪川 祥邦
• 金额: $ 2.66万
• 依托单位: Nagoya University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22K08797/
• 关键词: 膵癌; HIF1α; 低酸素応答性エレメント; 微小環境; 転写因子

膵癌は乏血性な腫瘍であり、低酸素な微小環境が特徴的である。本研究では低酸素誘導因子の一つであるHIF1αが膵癌においてどのように低酸素抵抗性に関わるのか、そのメカニズムを解明することを目的とする。まず名古屋大学医学部附属病院・消化器外科学教室で保有する膵癌細胞株であるKP1NLおよびTU8902、また多血性の特徴を持つ肝細胞癌の細胞株であるHepG2およびHIF1αを用いてsiRNAによるHIF1αのノックダウン実験を行った。それぞれ、siCtrlに比較して1～3%までmRNAの発現を低下させることに成功した。これらHIF1αをノックダウンした細胞株およびコントロールから抽出したmRNAを用い、PCR array解析を行い、Human Hypoxia Signaling Pathwayについての分子の発現を比較した。PCR array内にもHIF1αが含まれており、４つの細胞株において再現性を持ってsiRNAによりHIF1α発現が低下していた。血管新生に関わる分子であるVEGFAの発現は膵癌細胞株でのHIF1αノックダウンで1.00, 0.76と比較的低下していないのに対し、肝細胞癌細胞株では0.67, 0.75と低下している傾向を認めた。これは低酸素な腫瘍環境下において膵癌は乏血性であるのに対し、多血性の肝細胞癌がよりVEGFによる血管新生促進を誘導していることに合致するデータと考えられた。VEGFAのように肝細胞癌でより低下している傾向を認める分子としてPGF、SLC2A1、ALDOC、BHLHE40、などが認められ、逆に膵癌でより低下している傾向のある分子としてはADORA2B、ANXA2、ARNT、EGLN2などが同定された。これらの低酸素応答性パスウェイの分子とHIF1αの相関が臨床検体でも認められるか、膵癌症例において評価するために標本から順次RNA抽出、cDNA作成を進めている。

The cancer is deficient in blood and swelling, and the acid is low in the microenvironment. This study was designed to elucidate the role of HIF-1 α in the development of low acid resistance in cancer. The Department of Digestive Surgery, Nagoya University School of Medicine maintains a hepatocellular carcinoma cell line, HepG2 and HIF 1 α, characterized by multiple bloodlines. mRNA expression was lower by 1~3% compared with control group. The expression of HIF-1 α mRNA in cell lines, PCR array analysis, and the expression of HIF-1 α in human hypoxia-signaling pathways were compared. HIF-1 α expression in PCR array was decreased by siRNA, and reproducibility of HIF-1 α was maintained in 4 cell lines. The expression of VEGFA in angiogenesis related molecules decreased by 1.00 and 0.76 in cancer cell lines and by 0.67 and 0.75 in hepatocellular carcinoma cell lines. This is the first time that VEGF has been used to induce angiogenesis in hepatocellular carcinoma. VEGFA has a tendency to decrease in hepatocellular carcinoma. Molecules such as PGF, SLC2A1, ALDOC, BHLHE40, ADORA2B, ANXA2, ARNT, EGLN2 have a tendency to decrease in hepatocellular carcinoma. The relationship between HIF-1 α and its response to low levels of RNA was studied in clinical trials and in cancer cases.