海馬歯状回における神経細胞の新生低下に注目した慢性疼痛の発症機序解明

阐明慢性疼痛的发病机制，重点关注海马齿状回神经发生减少

• 批准号: 22K09077
• 负责人: 青木 優祐
• 金额: $ 2.66万
• 依托单位: Nagoya City University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22K09077/
• 关键词: 慢性疼痛; 海馬歯状回; 神経細胞の新生低下

本研究では、疼痛の遷延化が海馬歯状回の神経新生の低下によることを明らかにすることを最終目的とし、その変化を引き起こす神経回路を同定することを目的としている。本年度は、痛みにより活性化する神経回路を特異的に調節するマウスの作製を行った。特異的調節では、痛みを伝える神経回路へ、デザイナー受容体（DREADD）であるhM3DqならびにhM4Diをシナプシンプロモーターの制御により神経細胞へ発現するアデノ随伴ウイルスベクター（AAV）を、末梢からの痛みの入力点である脊髄後角へ微量注入することで作製を試みた。まず、神経細胞特異的に蛍光タンパク質であるEGFPを発現するAAV（AAVDJ-hSyn-EGFP）を脊髄後角へ微量注入し、その8週間後に脳を取り出し、蛍光タンパク質の発現を観察した。その結果、外側腕傍核（LPb）ならびに外側視床（VPＬ）に緑色蛍光が認められた。次に、興奮性DREADDであるhM3Dqを発現するAAV（AAVDJ-hSyn-hM3Dq-mCherry）を脊髄後角へ微量注入し8週間後に、hM3Dqの特異的リガンドであるクロザピンN-オキシド（CNO）をLPbならびにVPLへそれぞれ投与すると、一過性の痛覚過敏が認められた。また、CNOを14日間連続してオスモティックミニポンプを用いてLPbならびにVPLへ投与すると、痛み閾値の持続的な低下が認められ、CNOの投与を中止しても、LPbへCNOを処置した群では痛み閾値の低下が持続したものの、VPLへCNOを投与した群では痛み閾値が回復した。これらのことから、痛みの慢性化に対しては、脊髄後角からLPbへ投射する神経が重要であることがわかった。また、神経障害性疼痛モデル（Spared nerve injury モデル）では、海馬歯状回における神経新生が低下していることを確認した。

这项研究的最终目的是阐明长时间的疼痛是由于海马齿状回的神经发生的减少而引起的，并确定导致这种变化的神经回路。今年，我们创建了专门调节疼痛激活神经回路的小鼠。在特定的调节中，我们试图通过控制突触素启动子的控制，将表达设计器受体（Dreadds）HM3DQ和HM4DI的表达设计器受体（Dreadds）HM3DQ和HM4DI的表达设计器受体（Dreadds）HM3DQ和HM4DI通过控制脊髓的脊髓的背角，从而将其注入脊髓疼痛，从而将其注入神经细胞。首先，将表达神经元特异性荧光蛋白的AAV（AAVDJ-HSYN-EGFP）注射到脊髓的背角中，八周后去除大脑并观察到荧光蛋白的表达。结果，在侧面止痛核（LPB）和外侧丘脑（VPL）中观察到绿色荧光。接下来，将AAV（AAVDJ-HSYN-HM3DQ-MCHERRY）的显微注射表达兴奋性dreadd，然后在脊髓的背角中进行了8周后，当氯氮平N-氧化物（CNO）（CNO）（CNO）（CNO）（CNO）的特定配体用于LPB和VPL，并且均为vpl，并且可以实现。 Furthermore, when CNO was administered to LPb and VPL using an osmotic mini pump for 14 consecutive days, a continuous decrease in the pain threshold was observed, and even after the administration of CNO was stopped, the pain threshold was continued in the group treated with CNO to LPb, but the pain threshold was restored in the group administered with CNO to VPL.这些发现表明，从脊髓背角向LPB投射的神经对于慢性疼痛很重要。此外，一种神经性疼痛模型（保存神经损伤模型）证实，海马齿状回中的神经发生减少。