权益分类	功能权益	普通用户	{{item.name}}会员
{{category.name}}	{{benefitItem.name}}

GABA-A受容体パルミトイル化によるベンゾジアゼピン系薬剤耐性メカニズムの解明

GABA-A受体棕榈酰化阐明苯二氮卓类药物耐药机制

基本信息

批准号：
22K09086
负责人：
下山修司
金额：
$ 2.66万
依托单位：
Hirosaki University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2022
资助国家：
日本
起止时间：
2022-04-01 至 2025-03-31
项目状态：
未结题

项目摘要

パルミトイル化予測ツールを用いた結果、当初標的としていたβ3サブユニットのシステイン残基(C313)だけではなく、別のシステイン残基(それぞれC23及びC24)もパルミトイル化される可能性が示唆された。これを踏まえ、これらのシステイン残基をアラニンに置換した変異体を作製し、その細胞内局在を解析した。その結果、C23とC24でも細胞膜での発現が著しく減少しており、チャネルとしても機能できないことがわかった。一方、C313変異体では、細胞膜での発現が低いもののチャネルとして機能できていることがわかった。しかしながら、GABAに対する感受性が著しく減少していたことから、C313は細胞内の局在だけではなく、チャネル特性にも関与していることが示唆された。また、これらのシステイン残基はタンパク質の立体構造に重要なジスルフィド結合とは関係がなく、AlphaFold2による構造予測を行っても野生型とはほとんど差がないため、変異体によるコンフォメーションの変化は最小限度であると考えられる。そのため変異体の分布と機能の変化は、パルミトイル化されなくなった結果だと言える。以上の結果より、GABA受容体のβ3サブユニットはパルミトイル化されることで、細胞膜に発現して、受容体として機能することが示唆された。今後は、細胞膜に移行せずに細胞内のどこに蓄積しているのか、パルミトイル化に関わる酵素の同定を行うとともに、これらの結果が細胞レベルではなく個体でも起きている現象なのか、を明らかにしていく。これらの研究を推進することで、細胞膜における発現低下を原因とするベンゾジアゼピン系化合物の効果減弱メカニズムを明らかにすることができ、効果が減弱しない薬剤の開発に繋げることができる。

The results of the preliminary test showed that the β3-mer residue (C313) of the initial target was separated from the other residues (C23 and C24), and the possibility of the initial reaction was discussed. This is the first time that we've had a change in the structure of a cell. As a result, C23 and C24 cell membranes appear to decrease in size and function. A side, C313 different, cell membrane development and low middle and high middle and low middle and high middle and high middle and low middle and high middle and low and low and high and high and low and high and low and high and high and The sensitivity of GABA to C313 cells is reduced, and the characteristics of C313 cells are related to GABA. The residue of the protein is important for the stereostructure of the protein, and the structure of the protein is predicted by the structure of the protein. The distribution and function of different species are different, and the results are different. These results indicate that the β3-subunit of GABA receptor is involved in cell membrane development and receptor function. In the future, cell membrane migration will occur within the cell, such as accumulation, synchronization, and results. The study of the causes of the decrease in the occurrence of cell membrane damage is being carried out.