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新規ニッケル結合性T細胞を基軸としたニッケルアレルギー病態形成機構の解明

基于新型镍结合T细胞阐明镍过敏发病机制

基本信息

批准号：
22K09939
负责人：
黒石智誠
金额：
$ 2.66万
依托单位：
Tohoku University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
2022
资助国家：
日本
起止时间：
2022-04-01 至 2025-03-31
项目状态：
未结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22K09939/
关键词：
金属アレルギーニッケルアレルギー CD4陽性T細胞

项目摘要

皮膚所属リンパ節におけるNi結合性CD4+T細胞の解析マウス皮膚所属リンパ節細胞をin vitroでNi溶液と反応させた後、金属イオン蛍光プローブであるNewport green（NPG）および各種蛍光抗体で染色し、フローサイトメトリーで解析した。その結果、CD4+T細胞（B220-NK1.1-CD4+）の約0.5%がNPG強陽性のNi結合性細胞であった。また、CD4+T細胞全体の約24%がCD62L-であったのに対し、Ni結合性CD4+T細胞では約95%がCD62L-であった。さらに、CD4+T細胞全体の約4%がCD25+であったのに対し、Ni結合性CD4+T細胞では約13%がCD25+であった。同様の方法で解析したNi結合性樹状細胞の場合、Ni結合能（NPG染色の平均蛍光強度）について、皮膚所属リンパ節では腸間膜リンパ節に比較して有意に高値であった。これに対し、Ni結合性CD4+T細胞の場合、その存在比率やNPG染色の平均蛍光強度について、両リンパ節の間に有意差は認められなかった。NiアレルギーマウスにおけるNi結合性CD4+T細胞の解析Ni感作マウスの耳介にNi溶液を皮下接種し（Niチャレンジ）、Niアレルギー性炎症を誘導した。そして、所属リンパ節（耳介リンパ節）と非所属リンパ節（鼠経リンパ節）におけるNi結合性CD4+T細胞を解析した。その結果、所属、非所属リンパ節のいずれにおいても、Ni結合性CD4+T細胞の存在比率やNPG染色の平均蛍光強度に有意な差は認められなかった。また、ナイーブ（Ni非感作）マウスの耳介へリポポリサッカライド（LPS）や高濃度Ni溶液を皮下接種し非アレルギー性炎症を誘導した場合においても、所属リンパ節と非所属リンパ節におけるNi結合性CD4+T細胞の存在比率に有意な差は認められなかった。

Analysis of Ni-binding CD4 +T cells in vitro Ni solution and in vitro analysis of Newport green (NPG) with various fluorescent antibodies Results: About 0.5% of CD4 +T cells (B220-NK1.1-CD4 +) were strongly positive for NPG and Ni binding cells. About 24% of CD4 +T cells were CD62L-negative, and about 95% of Ni-positive CD4 +T cells were CD62L-negative. About 4% of CD4 +T cells were CD25 +, while about 13% were Ni-binding CD4 +T cells. The same method was used to analyze Ni binding dendritic cells, Ni binding energy (average fluorescence intensity of NPG staining), skin belonging to different nodes, intestinal membrane separation nodes, and intentionally high values. In this case, Ni-binding CD4 +T cells are present in the ratio of NPG staining to the average fluorescence intensity, and in the interval between the segments. Ni binding CD4 +T cell analysis Ni sensing Ni solution subcutaneous inoculation Ni binding CD4 +T cell induction Ni binding CD4 + T cell induction Ni binding CD4 + T cell CD4 +T cell analysis is performed on the cells that belong to and do not belong to the cell. The results showed that there was a significant difference in the presence of Ni-binding CD4 +T cells and the mean fluorescence intensity of NPG staining. The presence of Ni-binding CD4 +T cells in the presence of high concentration of Ni solution, subcutaneous inoculation, and induction of non-inflammatory inflammation is intentionally different from that in the presence of Ni-binding CD4 +T cells.