权益分类	功能权益	普通用户	{{item.name}}会员
{{category.name}}	{{benefitItem.name}}

ビオチンによるエピジェネティック制御を介した免疫調節機構の解明

阐明生物素表观遗传调控介导的免疫调节机制

基本信息

批准号：
20791369
负责人：
黒石智誠
金额：
$ 2.66万
依托单位：
Tohoku University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
财政年份：
2008
资助国家：
日本
起止时间：
2008 至 2009
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-20791369/
关键词：
免疫学アレルギビタミンエピジェネティク

项目摘要

1. ビオチン化ヒストン検出系の確立ビオチン化ヒストンの検出系の確立のため, マウスマクロファージ様細胞株であるJ774細胞より核画分を調整し, 塩酸抽出法によりコアヒストンを抽出した。Western blotting法による解析から, ヒストンH2A, H2B, H3およびH4の分離・抽出を確認した.そこで, この塩酸抽出画分をペルオキシダーゼ標識アビジンによるwestern blotting法で解析し、ヒストンのビオチン化を解析した.その結果, H2A, H2B, H3およびH4のいずれのコアヒストンも検出され, これらのコアヒストンのビオチン化が確認された.2. ビオチン欠乏細胞におけるビオチン化ヒストンの解析次いで、ビオチン欠乏条件下で培養したJ774細胞からコアヒストンを抽出し, そのビオチン化状態について, 正常(ビオチン充足)条件下で培養したJ774細胞由来コアヒストン抽出物と比較, 解析した. その結果, ビオチン欠乏, 充足, いずれの細胞株由来コアヒストンにおいても, 同程度のビオチン化ヒストンが検出された. また, ビオチン欠乏および充足細胞を大腸菌由来lipopolysaccharide(LPS)で刺激し, ヒストンのビオチン化を解析した. しかしながら, ビオチン欠乏/充足, LPS刺激の有無に関わらず, ヒストンのビオチン化に違いは認められなかった.以上の結果から, ベルオキシダーゼ標識アビジンによるwestern blotting法ではヒストンのビオチン化を正確に検出, 解析することが困難である可能性が示唆された. このため, 既に報告されているビオチン化ヒストン特異的モノクローナル抗体を入手するなどして, より詳細に解析を継続する必要があると考えられる.

1. In order to make sure that the system is correct, the cell line is J774 cell line, and the acid extraction method is used. Western blotting method was used to analyze and confirm the separation of H2A, H2B, H3 and H4. This is the first time that the western blotting method has been analyzed, and that the analysis has been changed. The results show that H2A, H2B, H3, H2A, H2B, H3, H2B, H3. In the absence of cells, in the cells of J774, in the absence of conditions, the cells of J774 were analyzed in terms of their origin, the ratio of extracts, the ratio of extractives. The results showed that the disease was deficient and sufficient. The cell line of the disease was caused by the disease, and the disease occurred in the same degree. The lipopolysaccharide (LPS) stimulation is caused by the lack of sufficient cells, and the chemical analysis is caused by the infection. The symptoms are poor