子実体形成のトリガー -光応答分子機構の解明-

子实体形成的触发因素-光响应分子机制的阐明-

• 批准号: 25292053
• 负责人: 宮崎 安将
• 金额: $ 10.98万
• 依托单位: Forestry and Forest Products Research Institute
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
• 财政年份: 2013
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2013-04-01 至 2016-03-31
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-25292053/
• 关键词: 子実体形成; きのこ; 光受容体; シイタケ; 光; 遺伝子

シイタケの子実体形成には光が必要である。現在までに光受容体をコードする遺伝子phrA, phrB, Le.cryを単離・同定しているが、光受容体は光を一番最初に受け取る分子であるため、これらの発現は分化ステージによらず、構成的であることが多い。そこで、きのこ類に存在する光応答メカニズムを含めた関連因子（タンパク質）を網羅するため、シイタケにおける子実体形成過程を①栄養増殖菌糸、②子実体原基、③成熟子実体に分け、各々の試料から細胞内タンパク質を抽出し、二次元電気泳動に供した。3種の蛍光染色（全タンパク質染色、リン酸化タンパク質染色、糖鎖付加タンパク質染色）を行い、モレキュラーイメージャーにて解析した。検出されたタンパク質は、各々の分化ステージにおいて約6000種類、リン酸化タンパク質は約300種類、糖鎖付加タンパク質は約30種類存在することが明らかとなった。発現に差異のあるスポットをゲルから切り出した後プロテアーゼ処理を行い、目的タンパク質の分解産物（ペプチド）画分を得た。サンプルはLC-MS/MSにてアミノ酸配列解析を行った後、タンパク質質量分析器データベース（マスコット・サーバー）に対し相同性検索を行い、目的産物タンパク質を同定・機能推定を行った。その結果、子実体形成期に特異的に発現するタンパク質は、その発現が上昇するもの（脂肪酸分解酵素、ATP合成タンパク質、G-タンパク質ファミリー、細胞骨格タンパク質、シグナル伝達関連因子等）と、一方減少するもの（カタラーゼ、アルコールデヒドロゲナーゼ、オキシドレダクターゼ等）が同定された。これらタンパク質は、現在までのトランスクリプトーム解析によるデータと照らし合わせ、きのこの子実体形成期間に細胞内で起こっている代謝やシグナル伝達経路を如実に反映しているものと示唆された。

Youdaoplaceholder0 シ タケ the physical form of the mion に the が light が is necessary である. Now ま で に light by let body を コ ー ド す る heritage 伝 phrA, phrB, Le. Cry を 単 leaves, with fixed し て い る が, light let body は を light some initial に by molecular で け take る あ る た め, こ れ ら の 発 は differentiation now ス テ ー ジ に よ ら ず, composition of で あ る こ と が い more. そ こ で, き の こ classes exist に す る light 応 answer メ カ ニ ズ ム を containing め た masato even factor (タ ン パ ク qualitative) を snare す る た め, シ イ タ ケ に お け る son be body formation を (1) tech students.their ownship have raised colonization bacteria si, (2) be body primordia, (3) mature son be に け, each 々 の sample か ら intracellular タ ン パ ク qualitative を spare し bathing, secondary yuan electric 気 に for し た. Three の 蛍 light staining (full タ ン パ ク dyeing, リ ン acidification タ ン パ ク quality dyeing, sugar lock pay plus タ ン パ ク mass dyeing) を い, モ レ キ ュ ラ ー イ メ ー ジ ャ ー に て parsing し た. 検 out さ れ た タ ン パ ク は, each 々 の differentiation ス テ ー ジ に お い て about 6000 kinds, リ ン acidification タ ン パ ク qualitative は about 300 kinds, sugar plus lock タ ン パ ク qualitative は about 30 types exist す る こ と が Ming ら か と な っ た. 発 に difference now の あ る ス ポ ッ ト を ゲ ル か ら り cutting out し た after プ ロ テ ア ー ゼ 処 を line い, purpose タ ン パ ク qualitative の breakdown products (ペ プ チ ド) draw points を た. サ ン プ ル は LC - MS/MS に て ア ミ ノ acid with column line analytical を っ た, タ ン パ ク mass quality analyzer デ ー タ ベ ー ス (マ ス コ ッ ト · サ ー バ ー) に し seaborne identity 検 cable line を い, purpose product タ ン パ ク qualitative を presumption, with fixed function, line を っ た. そ の results, the child be body formation に specific に 発 now す る タ ン パ ク は, そ の 発 now rising が す る も の (fatty acid decomposition enzyme, ATP synthesis タ ン パ ク qualitative, G - タ ン パ ク qualitative フ ァ ミ リ ー, cell skeleton タ ン パ ク qualitative, シ グ ナ ル 伝 of masato even factor, etc.) と, side to reduce す る も の (カ タ ラ ー ゼ, ア ル コ ー ル デ ヒ ド ロ ゲ Youdaoplaceholder0 ゼ ゼ, ナ キシドレダ タ タ ゼ ゼ, etc. Youdaoplaceholder5 are the same as された. こ れ ら タ ン パ ク は, now ま で の ト ラ ン ス ク リ プ ト ー ム parsing に よ る デ ー タ と according ら し close わ せ, き の こ の に during forming cells で son be bodies こ っ て い る metabolic や シ グ ナ ル 伝 da を 経 road such as be に reflect し て い る も の と in stopping さ れ た.

项目成果

きのこ類のゲノム解読

蘑菇基因组解码

• 发表时间: 2013
• 期刊: 生物工学会誌
• 作者: I. Sugai;M. Oyaizu;K. Bessho;and A. Tamii;菅井 勲;菅井 勲;宮崎安将;宮崎安将;宮崎安将;宮崎安将
• 通讯作者: 宮崎安将

ＬＥＤときのこへの活用

LED 和蘑菇的利用

• 发表时间: 2015
• 期刊: マイコファジスト
• 作者: I. Sugai;M. Oyaizu;K. Bessho;and A. Tamii;菅井 勲;菅井 勲;宮崎安将;宮崎安将
• 通讯作者: 宮崎安将

Fruiting body productions of basidiomycetous mushrooms using blue LED light.

使用蓝色 LED 灯生产担子菌蘑菇的子实体。

• 发表时间: 2013
• 作者: Y. Miyazaki;K. Masuno;M. Abe;H. Nishizawa;S. Kunitomo;H. Sakata;K. Nakamura;T. Koyama;H. Kazama;D. Suzuki;M. Kawai;K. Miyazaki;Y. Sakamoto;S. Kaneko;M. Nakamura
• 通讯作者: M. Nakamura

Light-stimulative genes for fruiting body formation in the basidiomycetous fungus Lentinula edodes.

担子菌真菌香菇子实体形成的光刺激基因。

• 发表时间: 2013
• 作者: Miyazaki Y;Sano H;Sakamoto Y;Abe M;Kaneko S;Nakamura M
• 通讯作者: Nakamura M

きのこの光応答メカニズムの解明及び高度利用技術の開発

蘑菇光响应机制阐明及先进利用技术开发

• 发表时间: 2015
• 期刊: 農業電化
• 作者: I. Sugai;M. Oyaizu;K. Bessho;and A. Tamii;菅井 勲;菅井 勲;宮崎安将
• 通讯作者: 宮崎安将