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ソラマメラジカル消去タンパク成分の細胞エイジングに関する研究

Sorama自由基清除蛋白成分对细胞衰老的研究

基本信息

批准号：
08878008
负责人：
岡田悦政
金额：
$ 0.58万
依托单位：
Chukyo Junior College
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Exploratory Research
财政年份：
1996
资助国家：
日本
起止时间：
1996 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

1.ラジカル消去タンパク成分の精製ソラマメラジカル消去活性タンパク成分は、スーパーオキシド、H_2O_2へのラジカル消去活性は見られたが、DPPHラジカルへの消去活性は見られなかった。また、Sephadex G-75ゲロろ過クトマトグラフィー法、SDS ポリアクリルアミドゲル電気泳動法により分子量は、14000であった。2.培養細胞への影響(1)培養細胞へのタンパク成分至適濃度-ソラマメタンパク成分はヒト線維芽細胞を1X10^5個播いて10日間後の細胞数を測定したところコントロールに比べて2.5μg/mlで30%ほど、5.0μg/mlで20%ほど細胞数を増加させることができた。2.5μg/mlが培養細胞への細胞増殖の至適濃度と考えられた。(2)短期培養下における細胞増殖への影響-タンパク成分2.5μg/mlを培養細胞に投与しながら4日、9日、17日、28日目までの細胞増殖への影響を確認したところ17日目以降においてコントロールより22%ほど細胞数を増大させていた。(3)老齢細胞における継代細胞寿命への影響-タンパク成分1.25μg/ml、2.5μg/mlを培養細胞(PDL40)の老齢細胞へ投与した結果、継代寿命への延長効果は見られなかった。(4)クローン培養-タンパク成分1.25μg/ml、2.5μg/mlを加えて24、48、72時間培養後の単一細胞の増殖への影響は見られなかった。3.細胞内抗酸化酵素活性への影響有機酸化剤tBHP100μMを培養細胞に2時間投与することにより細胞内SOD活性は未処理に比べて380%と大きく上昇したが、タンパク成分1.25μg/ml、2.5μg/mlをtBHP投与直前に20時間処理し、培地除去後、SOD活性を測定したところ、未処理に比べてそれぞれ30%、50%ほどの上昇に止めた。同様にカタラーゼ活性については、tBHP投与により、未処理に比べての上昇が40%ほどであったが、タンパク成分1.25μg/ml、2.5μg/ml事前投与群は、100%、125%と大きくカタラーゼ活性を上昇させた。

1. Refined ソラマメラジカカカジカルタンパク sterilized active ingredients, スーパーオキシド, H_2O_2 is the deactivator of H_2O_2, and the deactivator of DPPH is the deactivator of H_2O_2. SDS, Sephadex G-75 SDSポリアクリルアミドゲルelectrophoresis method により molecular weight は, 14000 であった. 2. The influence of cultured cells (1) The ingredients of cultured cells to the appropriate concentration-ソラマメタンパク ingredients はヒトline dimensional sprout cells を1X10^5 individual broadcast いて10 days later Cell count measurement method 2.5μg/ml 30%ほど、5.0μg/mlで20%ほどThe number of cells is increased by させることができた. 2.5μg/ml can be used to culture cells and promote cell proliferation to the appropriate concentration. (2) Effects on the growth of における cells under short-term culture - タンパク ingredient 2.5μg/mlを cultured cells were administered しながら on the 4th, 9th, 17th, On the 28th, the impact of cell proliferation has been confirmed. From the 17th The number of cells increased by 22%. (3) The influence of aging cells on the lifespan of older cells - 1.25μg/ml, 2.5μg/m of タンパク ingredients The result of administration of l-cultured cells (PDL40) to old cells, and the effect of prolonging the lifespan of the generation can be seen in the results. (4) クローン culture - タンパク ingredients 1.25μg/ml, 2.5μg/ml and the addition of えて for 24, 48 and 72 hours of culture will affect the proliferation of the cells and the effect of the られなかった. 3. The intracellular anti-acidification enzyme activity does not affect the organic acidification agent tBHP100μM when cultured cells are administered for 2 hours. The intracellular SOD activity of ることによりは is higher than that of べて380%, and the SOD activity is larger than that of したが and タンパク ingredients 1.25μg/ml, 2.5μg/ml, 20-hour treatment before BHP administration, and after removing the soil. The SOD activity is determined by the test, the untreated test is 30% higher than the test, and the test is increased by 50%. Same as ににカタラーゼActive については, tBHP injection により, Untreated に than べてのrise 40% ほどであったが, タンパク成It is divided into 1.25μg/ml and 2.5μg/ml beforehand to administer to the group, 100%, and 125% of the large active ingredients.