ソラマメラジカル消去タンパク成分の細胞エイジングに関する研究

Sorama自由基清除蛋白成分对细胞衰老的研究

• 批准号: 08878008
• 负责人: 岡田 悦政
• 金额: $ 0.58万
• 依托单位: Chukyo Junior College
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 1996
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1996 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-08878008/
• 关键词: ソラマメ; ラジカル消去タンパク質; 細胞エイジング; フリーラジカル; 細胞培養; 抗酸化酵素; PDL

1.ラジカル消去タンパク成分の精製ソラマメラジカル消去活性タンパク成分は、スーパーオキシド、H_2O_2へのラジカル消去活性は見られたが、DPPHラジカルへの消去活性は見られなかった。また、Sephadex G-75ゲロろ過クトマトグラフィー法、SDS ポリアクリルアミドゲル電気泳動法により分子量は、14000であった。2.培養細胞への影響(1)培養細胞へのタンパク成分至適濃度-ソラマメタンパク成分はヒト線維芽細胞を1X10^5個播いて10日間後の細胞数を測定したところコントロールに比べて2.5μg/mlで30%ほど、5.0μg/mlで20%ほど細胞数を増加させることができた。2.5μg/mlが培養細胞への細胞増殖の至適濃度と考えられた。(2)短期培養下における細胞増殖への影響-タンパク成分2.5μg/mlを培養細胞に投与しながら4日、9日、17日、28日目までの細胞増殖への影響を確認したところ17日目以降においてコントロールより22%ほど細胞数を増大させていた。(3)老齢細胞における継代細胞寿命への影響-タンパク成分1.25μg/ml、2.5μg/mlを培養細胞(PDL40)の老齢細胞へ投与した結果、継代寿命への延長効果は見られなかった。(4)クローン培養-タンパク成分1.25μg/ml、2.5μg/mlを加えて24、48、72時間培養後の単一細胞の増殖への影響は見られなかった。3.細胞内抗酸化酵素活性への影響有機酸化剤tBHP100μMを培養細胞に2時間投与することにより細胞内SOD活性は未処理に比べて380%と大きく上昇したが、タンパク成分1.25μg/ml、2.5μg/mlをtBHP投与直前に20時間処理し、培地除去後、SOD活性を測定したところ、未処理に比べてそれぞれ30%、50%ほどの上昇に止めた。同様にカタラーゼ活性については、tBHP投与により、未処理に比べての上昇が40%ほどであったが、タンパク成分1.25μg/ml、2.5μg/ml事前投与群は、100%、125%と大きくカタラーゼ活性を上昇させた。

1. Purification and purification of the active components of DPPH and H_2O_2-containing compounds. Sephadex G-75 is a molecular weight of 14000. 2. The effect of culture on cells (1) The number of cultured cells increased from 2.5μg/ml to 30% and 5.0μg/ml to 20% after 10 days. 2.5μg/ml was the optimal concentration for cell proliferation. (2)Effect of 2.5μg/ml of the compound on cell proliferation in short-term culture-The effect of 2.5μg/ml on cell proliferation was confirmed on the 4th, 9th, 17th, and 28th day of culture, and the number of cells increased by 22% on the 17th day. (3)Effect on the lifespan of cultured cells-The results of administration of Tamanpak components at 1.25μg/ml and 2.5μg/ml to cultured cells (PDL40) on the lifespan of cultured cells and the effect of prolonging the lifespan of cultured cells are already evident. (4)The effects of 1.25μg/ml and 2.5μg/ml on the proliferation of single cells cultured for 24, 48 and 72 hours were observed. 3. Effect of tBHP100μM on the activity of intracellular anti-acidifying enzyme In cultured cells, the activity of intracellular SOD increased by 380% compared with untreated cells, and the activity of SOD increased by 30% compared with untreated cells after treatment with tBHP 1.25μg/ml and 2.5μg/ml. The activity of tBHP increased by 40% compared with that of tBHP before treatment. The activity of tBHP increased by 100% compared with that of tBHP before treatment.

项目成果

岡田悦政・岡田瑞恵: "Effect of scavenging Protein of broad beans on free-radical species" BULLETIN of Chukyo Junior College. 27・1. 39-47 (1996)

冈田悦政和冈田水惠：“蚕豆蛋白对自由基的清除作用”中京短期大学公报27・1（1996）。

岡田悦政・岡田瑞恵: "空豆の抗酸化活性" 家政科教育. 70・11. 85-89 (1996)

冈田悦正和冈田水惠：“蚕豆的抗氧化活性”家政教育70・11（1996）。