ミトコンドリアと放射線感受性

线粒体和放射敏感性

基本信息

  • 批准号:
    09877175
  • 负责人:
  • 金额:
    $ 1.22万
  • 依托单位:
  • 依托单位国家:
    日本
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Exploratory Research
  • 财政年份:
    1997
  • 资助国家:
    日本
  • 起止时间:
    1997 至 1998
  • 项目状态:
    已结题

项目摘要

(1)ρ^++cell(親株)(2)ρ^0cell(ミトコンドリアDNA欠失株)(3)syn-cell(ミトコンドリアDNA変異株)これら3つの細胞を用いて、colony formationassayとDye exclusion testにより生存率・増殖能を、flow cytometryにより細胞周期・アポブトーシスの検討を行った。ミトコンドリアDNA欠損株においては親株に比して放射線感受性・アポプトーシス頻度が低く、syn一細胞ではいずれも回復した。syn一細胞では親株のρ十細胞に近い放射線感受性・アポプトフシス頻度が観察された(投稿中)。以上の結果の再現性を検討するために同様のミトコンドリアDNA欠損の肉腫細胞株で同様の検討を行っている。その際一部の細胞がコロとー形成が不良であるためにマイクロヌクレウスアッセイを導入した。Schiff試薬・DAP1など複数の染色法が報告きれているため現在どの方法が適しているか検討中である。またApo-tag Kitによりアポブトーシスを光学顕微鏡レベルでも確認している。さらに(1)酸素分圧を変更する系および(2)重粒子線を照射する実験系を構築中である。酸素分圧の変更系ではCHO細胞において通常/低酸素状態のRBEが2を越えることを確認した。重粒子線実験は98年12月に第一回の実紐が行われ、条件設定のための予備実験として線維芽細胞にたいして陽子線の照射を行いcolony formation assayとDye exclusion testを行った。
(1)ρ^++cell(parent strain)(2)ρ ^0 cell (non-null strain)(3)syn-cell(non-null strain)(3) cell viability, proliferation, flow cytometry, cell cycle, loss, etc.) The frequency of radiation sensitivity of the plant is lower than that of the parent plant, and the frequency of radiation recovery is lower than that of the parent plant. The frequency of radiation sensitivity in one cell and in ten cells of the parent strain was observed (submission in progress). The reproducibility of the above results was investigated in the same way as in the case of DNA deficient sarcoma cell lines. A part of the cell formation is not good. Schiff test DAP1: multiple staining methods for reporting and analysis The Apo-tag Kit is an optical microscopical tool for identification. (1) Acid component pressure change system;(2) Heavy particle radiation change system; The change of acid concentration is confirmed by CHO cells in normal/low acid state. In December 1998, the first round of heavy particle line test was carried out. The conditions were set up and the preparation was carried out. The colony formation assay and Dye exclusion test were carried out.

项目成果

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