下垂体前葉に存在する脊髄性進行性筋萎縮症原因遺伝子の分子生物学的研究

垂体前叶脊髓进行性肌萎缩症致病基因的分子生物学研究

• 批准号: 09877187
• 负责人: 加藤 幸雄
• 金额: $ 1.28万
• 依托单位: Gunma University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 1997
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1997 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-09877187/
• 关键词: 下垂体; 組換えDNA; クローニング; 発癌原因遺伝子

下垂体で発現している遺伝子のクローニングの過程で発見した多発性遺伝性外骨腫症原因遺伝子産物について、当該研究期間で以下のような研究成果を得た.1.多発性遺伝性外骨腫症原因遺伝子のブタ下垂体cDNAについて、その全長をクローニングし、ヒトの遺伝子解析より報告されているアミノ酸配列と比較して90%以上の相同性をもつ事を明らかにした.2.この遺伝子の臓器別の発現をRT-PCRにより調べ、多くの組織で発現していることを確認した.3.未知であるこの遺伝子の機能を明らかにするために、酵母の発現系でのタンパク質-タンパク質間相互作用を利用した機能解析クローニングシステムを用いるために、多発性遺伝性外骨腫症原因遺伝子の全長を、GAL4のDNA結合ドメインに融合させる形で組み込んだ酵母発現ベクターを作成した.一方、GAL4の転写活性化ドメインに融合させる形で下垂体のcDNAライブラリーを構築した.4.前項のシステムによるクローニングを行い、2つの陽性クローンの取得に成功した.一部の塩基配列を解析したところ、DNAのデーターベ一スとのホモロジー検索では未知の遺伝子であった.5.多発性遺伝性外骨腫症原因遺伝子物の産生細胞をin situ hybridizationにより調べ、本遺伝子は、下垂体組織では生殖腺刺激ホルモンを産生する細胞に特異的に存在する事を明らかにした.

During the study period, the following results were obtained: 1. The cause of polygenetic exostosis and the length of polygenetic exostosis. 2. The detection of the DNA fragment by RT-PCR, the detection of multiple tissues by RT-PCR, and the confirmation of the detection of multiple tissues by RT-PCR. 3. The function of the DNA fragment by RT-PCR. Yeast development system is composed of DNA binding genes of GAL 4, the length of gene, the fusion of DNA binding genes, and the formation of yeast development system. 1. GAL4 cDNA sequence was successfully constructed by fusion of cDNA sequence. A part of the gene sequence analysis, DNA gene analysis, gene analysis.

项目成果

Inaba,T.: "Recombinant porcine follicle stimulating hormone induce ovulation in hypophysectomised rats and tissue plasminogen activator expression in cultured rat granulosa cells" Research of Veterinary Science. 印刷中.

Inaba, T.：“重组猪促卵泡激素诱导垂体切除大鼠排卵和培养的大鼠颗粒细胞中组织纤溶酶原激活剂表达”《兽医科学研究》出版。

森純一: "ホルモン測定法の進歩-新しい測定法"時間分解蛍光イムノアッセイ"-" 日本胚移植学雑誌. 印刷中.

Junichi Mori：“激素测量方法的进展 - 新测量方法“时间分辨荧光免疫测定” -”日本胚胎移植杂志正在出版。

加藤幸雄: "「ホルモンの分子生物学:第3巻 生殖内分泌」-ゴナドトロピン-" 学会出版センター 印刷中,

加藤由纪夫：“‘激素分子生物学：第 3 卷生殖内分泌’-促性腺激素-”协会出版中心，印刷，

加藤幸雄: "組替え体性腺刺激ホルモンの生産と応用" 獣医畜産新報. 49. 39-43 (1988)

加藤幸雄：“重组促性腺激素的生产和应用”《兽医与畜牧杂志》49. 39-43 (1988)。

Inada,T.: "Baculovirus-insect cell production of bioactive porcine FSH" Theriogenology. 47. 491-499 (1997)

Inada,T.：“具有生物活性的猪 FSH 的杆状病毒昆虫细胞生产”动物发生学。