GHおよびPRL遺伝子の発現スイッチングを測定するリアルタイムシステムの開発

开发测量 GH 和 PRL 基因表达转换的实时系统

• 批准号: 12877166
• 负责人: 加藤 幸雄
• 金额: $ 1.28万
• 依托单位: Meiji University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 2000
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2000 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-12877166/
• 关键词: 下垂体; 転写調節因子; ホルモン; 遺伝子発現; CH; PRL; 組換えDNA

以下の成果を得た1)ウィスターおよびGHを生産するMtT/SからGHおよびPRL遺伝子の転写開始点上流域をクローニングし、全塩基配列の決定をおこない複数箇所の相互の変異を発見した。2)レポーター遺伝子に分泌型アルカリフォスファターゼ遺伝子を持つ発現ベクターに、上記クローンを連結した。プロラクチン遺伝子については初期のクローンの連結はできず、より短い領域に絞って連結した。3)発現ベクターを用いて、細胞への遺伝子導入を行った。その結果、GH遺伝子は細胞特異的な発現、すなわちGH遺伝子を発現しないCHOでは発現せず、GHを生産するGH3細胞ではレポーター遺伝子の発現を観察した。4)一方、PRL遺伝子上流を連結したコンストラクトはCHO細胞で発現しないことは、コントロールに用いた発現ベクターとの比較から確認できたが、遺伝子導入の条件が下垂体由来細胞に合わないのか現在のところ発現を確認できず、条件の検討を行っている。

The following results are obtained: 1) the difference between the number of sites and the number of sites in the process of production; 2) the difference between the number of sites in the process of production and the number of sites in the process of production; 3) the difference between the number of sites in the process of production and the number of sites in the process of production. 2) The secretion type of the gene is called "secretion type." The gene is called "secretion type."プロラクチン遗伝子については初期のクローンの链接はできず、より短い领域に绞って链接した。3) The introduction of gene into cells is carried out in the development of gene expression. The results showed that GH gene expression was cell-specific and GH gene expression was detected in CHO cells. 4)A PRL gene upstream link was established between CHO cells and PRL gene upstream link. The conditions for gene introduction were confirmed by comparing CHO cells with CHO cells.

项目成果

Chen,L.: "Cytological characterization of a pituitary folliclo-stellate-like cell line. Tpit/F1, with special reference to adenosine triphosphate-mediated neuronal nitric oxide synthase expression and nitric oxide secretion"Endocrinology. 141. 3603-3610 (

Chen,L.：“垂体滤泡星状细胞系的细胞学特征。Tpit/F1，特别参考三磷酸腺苷介导的神经元一氧化氮合酶表达和一氧化氮分泌”内分泌学。

Takesue,K.: "Stimulation of nitric oxide synthesis in porcine granulosa cells by phorbol ester"Journa of Reproduction and Development. 47. 1-6 (2001)

Takesue,K.：“佛波酯刺激猪颗粒细胞中的一氧化氮合成”生殖与发育杂志。

加藤幸雄: "成長ホルモン遺伝子とプロラクチン遺伝子の発現スイッチングのリアルタイム測定系の開発"成科学協会研究年報. 23. 167-172 (2000)

加藤幸雄：“生长激素和催乳素基因表达转换实时测量系统的开发”科学技术研究所研究年报23. 167-172（2000）。

Hattori M.: "FSH suppression of nitric oxide synthesis in porcine oocytes"Journa of Molecular Endocrinology. 24. 65-73 (2000)

Hattori M.：“FSH 对猪卵母细胞中一氧化氮合成的抑制”《分子内分泌学杂志》。

Nishida,N.: "Critical role of nitric oxide in expression of porcine LH receptor at transcription and post-transcription levels"Experimental and Clinical Endocrinology and Diabetes. 108. 424-429 (2000)

Nishida,N.：“一氧化氮在转录和转录后水平猪 LH 受体表达中的关键作用”实验和临床内分泌学和糖尿病。