歯周病原菌における蛋白分解システムとその異常の分子レベル解析

牙周病原菌蛋白质降解系统及其异常的分子水平分析

• 批准号: 09877353
• 负责人: 山本 健二
• 金额: $ 1.22万
• 依托单位: Kyushu University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 1997
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1997 至 1998
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-09877353/
• 关键词: Arg-gingipain; Lys-gingipain; システインプロテアーゼ; 歯周病原性プロテアーゼ; 蛋白分解システム; 酵素欠損変異体; Prophyromonas gingivalis; グラム陰性嫌気性細菌; Porphyromonas gingivalis

歯周病の主要な病原性細菌の一つであるPorphyromonasginglvalisには細胞結合型および細胞外分泌型のさまざまなプロテアーゼが存在しており、本菌の重要な生理機能や病原性機能を担っていると考えられている。筆者らはこれまで本菌が産生する主要なプロテアーゼとして2つのユニークなシステインプロテアーゼ(ペプチド結合の切断の特異性からアルギニン特異的システインプロテアーゼArg-gingipain(RGP)およびリジン特異的システインプロテアーゼLys-gingipain(KGP)と呼んでいる)の生化学的ならびに遺伝学解析を通じて両酵素が本菌の病原性発現に必須の因子であることを明らかにしてきた。本年度は、RGPをコードする2つの遺伝子とKGPをコードする遺伝子の両方を同時欠損させた三重変異株を作成し、野生株ならびに前年度に作成したそれぞれの酵素の単一完全欠損株のもつ様々な機能に及ぼす影響を調べた。その結果、三重欠損株では細胞内にも細胞外にもまったくRGPおよびKGPの活性は認められず、タイプIコラーゲンや免疫グロブリンなどの分解活性も検出されなかった。さらに、この変異株は牛血清アルブミンのみを含む栄養培地では生育することができなかった。これらの結果から、RGPおよびKGPは栄養源やエネルギー源として利用するアミノ酸の産土や菌体内への取込みに必須であることが明らかにされた。一方筆者らは、前縁度の研究からrgpAおよびkgp遺伝子のC末端領域とヘムアグルチニン遺伝子hagAには本菌の血球凝集素活性やヘモグロビン結合に必要な接着ドメインが存在していることを明らかにしているが、本研究ではrgpA・kgp・hagA欠損三重変異株を作成して野生株のもつ血球凝集素活性やヘモグロビン結合活性に及ぼす影響を調べた。その結果、この変異株では血球凝集素活性もヘモグロビン結合活性もなく、これらの遺伝子産物が本菌の血球凝集能やヘモグロビン結合能に大きく貢献していることが示された。

The main pathogenic bacteria in Weekly disease are the combination of Porphyromonasginglvalis cells and exocrine bacteria. The bacteria are important in physiology, physiology and pathogenicity. The main reason for the health of this fungus is that it is important to know that there is a problem in the health of the bacteria. This is the main reason for the health of the bacteria. This is the main reason for the health care of this fungus. (in combination with the cut-off of the characteristics of the bacteria, this is the main reason for the health of the bacteria. (in combination with the cut-off of the characteristics of the bacteria, the Arg-gingipain (RGP) is the key to the health of the bacteria.) The pathogenicity of the bacteria must be affected by the factors that affect the pathogenicity of the bacteria. In the current year, RGP has failed to improve the performance of the three-fold plant and the wild plant in the previous year. This year, there is a total shortage of enzyme enzymes in the previous year. In the current year, there is a significant increase in the number of KGP cells in the previous year. The results showed that the activity of RGP, extracellular, KGP, and immunized mice of the three strains were not detected. The strains of bovine serum were found to be pregnant and reared in the earth. The results show that it is necessary to verify that the KGP source is sensitive to the growth of bacteria in the body, and that the source is sensitive to the growth of bacteria in vivo. On the one hand, there was a study on rgpA, kgp, and C-terminal hemagglutinin activity. The hemagglutinin activity, hemagglutinin activity and hemagglutinin activity were detected. In this study, rgpA ·kgp ·hagA was used as a wild strain to detect hemagglutinin activity, hemagglutinin activity, hemagglutinin binding activity and hemagglutinin activity. Results: hemagglutinin activity, hemag

项目成果

Yamamoto K.et al.: "Proteolysis in Cell Functions" IOS Press(Hopsu-Have VK,Javinen M, Kirschke H,eds.), 576 (1997)

Yamamoto K.等人：“细胞功能中的蛋白水解”IOS Press（Hopsu-Have VK，Javinen M，Kirschke H，eds.），576（1997）

Nakanishi H., and Yamamoto K.: "Cathepsin E in the central nervous system. Aspartic Proteinases (Ed: James M.N.G)" Plenum Press, New York, 213-217 (1998)

Nakanishi H. 和 Yamamoto K.：“中枢神经系统中的组织蛋白酶 E。天冬氨酸蛋白酶（编者：James M.N.G）” Plenum Press，纽约，213-217 (1998)

kunimatsu K.et al.: "Immunohistochemical study on cathepsin G and medullasin in inflamed gingival tissues from periodontal patinets" J.Periodont.Res.32. 264-270 (1997)

kunimatsu K.等人：“牙周病发炎牙龈组织中组织蛋白酶 G 和髓质素的免疫组织化学研究”J.Periodont.Res.32。

江頭 亨 外: "老化マーカーの検索とその制御" 日本薬理学雑誌. 110. 136-138 (1997)

Toru Egashira：“寻找衰老标记及其控制”日本药理学杂志 110. 136-138 (1997)。

Tominaga, K. et al.: "Excitotoxin-induced neuronal death is associated with response of an unique intracellular aspartic proteinase cathepsin E." J. Neurochem.71. 2574-2584 (1998)

Tominaga, K. 等人：“兴奋毒素诱导的神经元死亡与独特的细胞内天冬氨酸蛋白酶组织蛋白酶 E 的反应有关。”