新しい血液プロテアーゼ・カスケード経路の探索

PHBP(plasma hyaluronan-binding protein)とはヒアルロン酸に結合するヒト血漿タンパク質であり、1995年に我々が発見した。3個EGF、1個クリングル、1個セリンプロテアーゼというドメイン構成であり、血液凝固のXII因子、線溶系のウロキナーゼ、および肝増殖因子HGFの活性化因子HGFAと相同性がある。そこでPHBPもこれらと似た新規カスケード経路の因子ではないかと考えた。1) PHBPの活性化機構: PHBPはA rg-Ile結合が切断されて活性化するが、既知のプロテアーゼ群では生理的活性化を起こさないので、自己活性化を起こすという仮説を立てて次の実験を行った。まず活性化PHBPがPHBPを活性化できることを確認できた。しかし理論的に得られるべき指数的活性化はみられなかった。その理由は、活性化PHBPは、さらに活性化PHBPのセリンプロテアーゼの1カ所も切断して不活性化するためらしい。、PHBPはカスケード経路の第一段階に位置すると推測して、プロテアーゼ以外の内因性物質が活性化、活性化の維持に関与するのではないかと考え、糖質、脂質、非プロテアーゼ性タンパク質を共存させて活性化を調べた。その結果、リン脂質が活性化を促進することを見出した。この性質はXII因子に似ている。2) 活性化PHBPの基質: 活性化PHBPが特異的に切断する血液蛋白質を、血清に活性化PHBPを添加して検討した。その結果、フィブリノーゲンを効率よく切断することを見出した。しかし切断部位はトロンビンと異なり、またフィブリンは形成しなかった。現在、フィブリンを凝固以外の生理活性を示すように活性化する(例えば、組織再生、血管新生など)のではないかとという仮説で研究を進めたい。以上、まだ新規カスケード系を確認するに至っていないが、有望な状況になりつつある。

PHBP(plasma hyaluronan-binding protein)とはヒアルロン酸に結合するヒト血漿タンパク質であり、1995年に我々が発見した。3個EGF、1個クリングル、1個セリンプロテアーゼというドメイン構成であり、血液凝固のXII因子、線溶系のウロキナーゼ、および肝増殖因子HGFの活性化因子HGFAと相同性がある。そこでPHBPもこれらと似た新規カスケード経路の因子ではないかと考えた。1) PHBPの活性化機構: PHBPはA rg-Ile結合が切断されて活性化するが、既知のプロテアーゼ群では生理的活性化を起こさないので、自己活性化を起こすという仮説を立てて次の実験を行った。まず活性化PHBPがPHBPを活性化できることを確認できた。しかし理論的に得られるべき指数的活性化はみられなかった。その理由は、活性化PHBPは、さらに活性化PHBPのセリンプロテアーゼの1カ所も切断して不活性化するためらしい。、PHBPはカスケード経路の第一段階に位置すると推測して、プロテアーゼ以外の内因性物質が活性化、活性化の維持に関与するのではないかと考え、糖質、脂質、非プロテアーゼ性タンパク質を共存させて活性化を調べた。その結果、リン脂質が活性化を促進することを見出した。この性質はXII因子に似ている。2) 活性化PHBPの基質: 活性化PHBPが特異的に切断する血液蛋白質を、血清に活性化PHBPを添加して検討した。その結果、フィブリノーゲンを効率よく切断することを見出した。しかし切断部位はトロンビンと異なり、またフィブリンは形成しなかった。現在、フィブリンを凝固以外の生理活性を示すように活性化する(例えば、組織再生、血管新生など)のではないかとという仮説で研究を進めたい。以上、まだ新規カスケード系を確認するに至っていないが、有望な状況になりつつある。