アルツハイマー病原因遺伝子のヒト組織における発現制御

人体组织中阿尔茨海默病致病基因表达的调控

基本信息

批准号：
08838006
负责人：
小山文隆
金额：
$ 1.54万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
财政年份：
1996
资助国家：
日本
起止时间：
1996 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-08838006/
关键词：
アルツハイマー病 Presenilin2 mRNAレベルトランスジェニックマウス

项目摘要

アルツハイマー病(Alzheimer′s disease:AD)は初老から老年期にかけて発症する進行性の痴呆である。ADの大部分は家族歴を持たないが、常染色体優性遺伝する家系が知られている。最近、第14および第1染色体上に存在するADの原因遺伝子が明らかになり、それぞれPresenilin(PS)1、PS2と名づけられた。ADの研究で重要なことは、塩基レベルでの点突然変異が両遺伝子間で保存されているアミノ酸で起こると、その変異を持つ者は100%ADになる点である。本研究ではPS2遺伝子とAD病変形成との関係を明らかにするため、ヒト組織でのPS2遺伝子発現をmRNAレベルより調べ、その結果をもとにモデルマウス確立を試みた。PS2 mRNAは調べた限りの胎児、成人組織で広く発現していた。最も高い発現は胎児脳で、次がadrenal glandであった。PS2の発現レベルは、PS1遺伝子に比べて低く、1/5-1/10程度であった。すでに生化学的及び神経病理学的に解析した老人脳を用い、PS2遺伝子発現レベルとADに特徴的な二つの病変、β-amyloidとPHFの形成との関係を調べたが、明確な相関は認められなかった。このことはPS2 mRNA発現レベルより、アミノ酸変異がAD発症に重要な役割を果たすことを示唆している。以上の結果をもとにモデルマウスの確立を試みた。常染色体優性遺伝する家系(Volga-German family)で見い出されたPS2遺伝子の変異(N141I)を有するcDNA、および変異を有さない(wild type)PS2 cDNAをβ-actin promoterの下流にそれぞれつなぎ、マウス受精卵に注入した。導入DNAを解析することで、ファウンダーを選別し、交配を行った。その結果wildおよびmutantともそれぞれ2系統ずつ確立することが出来た。これらのトランスジェニックマウスではいずれも、組み込んだ遺伝子が蛋白質に翻訳されることを確認している。今後、分子細胞生物学的手法を用いAD病変形成機構について詳細に検討する予定である。

阿尔茨海默氏病（AD）是一种进展性痴呆，从老年人中部发展到老年人。大多数广告没有家族史，但常染色体主导家庭是众所周知的。最近，染色体14和1上存在的AD的致病基因已被揭示，分别命名为Presenilin（PS）1和PS2。 AD研究中的重要一件事是，当两个基因之间保守的氨基酸处的点突变发生时，该突变的点突变将具有100％的AD。在这项研究中，为了阐明PS2基因与AD病变形成之间的关系，我们研究了在mRNA水平下人类组织中PS2基因的表达，并根据结果，我们试图建立模型小鼠。据我们所知，PS2 mRNA在胎儿和成人组织中广泛表达。最高的表达是在胎儿大脑中，其次是肾上腺。 PS2的表达水平低于PS1基因的表达水平，约为1/5-1/10。使用已经在生化和神经病理学上已经分析的老年大脑，我们研究了PS2基因表达水平与AD，β-淀粉样蛋白和PHF的两个病变特征的形成之间的关系，但找不到明显的相关性。这表明氨基酸突变在AD发育中起重要作用，而不是PS2 mRNA表达水平。基于上述结果，我们试图建立模型鼠标。在常染色体显性家族（Volga-german家族）和野生型PS2 cDNA中发现的PS2基因中携带突变（N141I）的cDNA分别连接到β-肌动蛋白启动子的下游，并注射到小鼠施肥的卵中。通过分析引入的DNA，选择创始人并交配。结果，建立了两个菌株，既野生又突变。在所有这些转基因小鼠中，已经证实综合基因被转化为蛋白质。将来，我们将使用分子细胞生物学技术详细考虑AD病变形成的机理。