環境中ダイオキシンによる免疫抑制機構の解明

阐明环境二恶英引起的免疫抑制机制

基本信息

批准号：
09876085
负责人：
藤田正一
金额：
$ 1.15万
依托单位：
Hokkaido University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Exploratory Research
财政年份：
1997
资助国家：
日本
起止时间：
1997 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-09876085/
关键词：
ダイオキシン免疫 Ahレセプター TCDD レチノイン酸

项目摘要

近年ダイオキシン類化合物の重要な生体作用の一つとして、発癌や催奇形性と並んで免疫不全の惹起が注目されつつある。ダイオキシンが結合するAhレセプターと同じファミリーに属している細胞質内レセプターとしてグルココルチコイド(GC)レセプターがあるが,これはGCと結合したのち核内に移動し免疫細胞における機能分子の発現を転写レベルで抑制することが知られている。申請者はダイオキシン類化合物による免疫抑制作用において,AHレセプターがGCレセプターと同様に種々の免疫細胞の機能分子の発現を転写レベルで抑制しているという作業仮説をたて、その抑制機構を解明する目的でまず、種々の培養細胞を用いてAhレセプターの発現を調べた。AhレセプターcDNAの400残基を増幅させるオリゴヌクレオチドを設計し,種々の免疫担当細胞由来のtotal RNAを用いて,RT-PCRを行った。HUVEC、HepG2,RBLの細胞系において,Ahレセプターの発現が認められた。また、レチノイン酸刺激により、単球においてもマクロファージへの分化の過程でAhレセプターの発現が誘導されることが確認された。TCDDを培養免疫担当細胞に作用させ,細胞上のCR3およびCR4またはCD14(LPSレセプター)の発現量の変化を解析するため,それぞれの抗体を用いてフローサイトメトリー解析を行った。しかし,これらの分子についても,経時的変化は認められなかった。今後,ほかの機能分子の解析が必要であると考えられる。また、ダイオキシンの免疫抑制がAhレセプターを介さない可能性も検討しなければならない。

近年来，二恶英化合物的重要生物学作用之一是诱导免疫缺陷以及癌变和变性。糖皮质激素（GC）受体与二恶英结合的AH受体在同一家族中，已知该受体在与GC结合后迁移到核中，并抑制了转录水平免疫细胞中功能分子的表达。申请人已经建立了一个有效的假设，即在二恶英化合物的免疫抑制作用中，AH受体抑制了转录水平的各种免疫细胞的功能分子的表达，就像GC受体一样，并首先使用各种培养细胞来检查AH受体的表达，以阐明抑制抑制性机制。设计了扩增AH受体cDNA的400个残基的寡核苷酸，并使用来自各种免疫能力细胞的总RNA进行RT-PCR。在HUVEC，HEPG2和RBL的细胞系中观察到AH受体的表达。还证实，在分化为巨噬细胞的过程中，视黄酸刺激在单核细胞中诱导了AH受体的表达。将TCDD与培养的免疫能力细胞反应，并使用各自的抗体进行流式细胞仪，以分析细胞上CR3，CR4或CD14（LPS受体）的表达水平的变化。但是，随着时间的推移，这些分子没有观察到这些分子的变化。人们认为，将来需要对其他功能分子进行分析。还应认为，二恶英的免疫抑制不会介导AH受体。