βアミロイド神経毒性の分子機構

β-淀粉样蛋白神经毒性的分子机制

• 批准号: 09835020
• 负责人: 内田 洋子
• 金额: $ 2.05万
• 依托单位: Tokyo Metropolitan Institute of Gerontology
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 1997
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1997 至 1998
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-09835020/
• 关键词: βアミロイド; 神経毒性; MAP1B; 胎児性抗原

′ Differential displayの結果得られたcDNA clone(F1812,F235,i 132,i 13-41)をprobeにして、library screeningを行った結果、F235として、1.213kbのcDNAが、i132として、3.572kbのcDNが得られた。F235にはmicrosatellile marker(TG or CA)n配列が含まれていたが、それ以外の部の塩基配列には、既知分子との相同性はなかった。i132はmouse MAP1B 8118-8812と90%の、human MAP1B 8290-9396と73%の相同性を示したため、rat MAP1Bの3'-non coding regionであと結論した。Aβによってその発現が誘導される遺伝子の一つがMAP1Bと同定されたため、他の微小管関連白のmRNA変化を、northern blotで調べた。その結果tauよりもMAP1Bの方が一過性に誘導さること、aged Aβよりもnew Aβの方がより一過性の誘導を引き起こすこと、また、ニューロンに先んじて、β-tubulin mRNAが特異的に減少することがわかった。次に、Aβ添加によるMAP1B白量の変化を、immunoblotで調べた。その結果、newAβ添加6時間後にわずかに増加するものの、24時間後には検出できないほどに減少していることがわかった。MAP1Bには3種類のtranscriptがあり、exon 3Uから始まるtranscriptの発現がadult brainよりもembryonic brainで多いとがわかっている。そこで、Aβ添加によって、どのaltemative transcriptの発現が増加するのかを、RT-PCR-southern b1otで解析した。その結果、new Aβ添加3時間後に、embryonic typeである3Uから始まるtranscriptが増加していることがわかった。本研究の結果、培養ニューロン内ではあるが、PHFのminor componentであり、胎児性抗原であるMAP1Bの発現を、Aβが一過性に誘導することが明らかとなった。

The results of Differential display experiments showed that the results of cDNA clone, library screening, F235, 1.213kb, i132, 3.572kb and cDN were successfully obtained. F235 compound microsatellile marker (TG or CA) n is equipped with the following parts, namely, the base array, the known molecule, the homology, the homology, and the other parts. I132 "mouse MAP1B 8118-8812", "human MAP1B 8290-9396" 73% "similarity" indicates the similarity between the two, and the rat MAP1B "3'-non coding region" is similar. A β-microtubule makes sure that the MAP1B is the same as that of the mRNA, and that the northern blot is the same as that of the microtubule. Results the results showed that tau, MAP1B, and aged A β, new A, β, β, and so on. Second, A β added "MAP1B whiteness", "immunoblot". The results showed that after the addition of 6 hours of newA β, there was no need to increase the number of cycles, and at 24 hours, there were no significant changes after 24 hours. MAP1B