アクティベーション・タギングを用いたアブシジン酸についてのシグナル伝達系の解析

使用激活标记分析脱落酸信号转导系统

• 批准号: 08760113
• 负责人: 鈴木 義人
• 金额: $ 0.58万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1996
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1996 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-08760113/
• 关键词: アブシジン酸; アクティベーションタギング; タバコ; シグナル伝達系

本研究は、activation taggingによりアブシジン酸(ABA)のシグナル伝達系の解析を行うことを目的としている。対象としたABAの作用はタバコのプロトプラストの分裂阻害能であり、ABAによる阻害を受けずに分裂する変異株の選抜を目指した。以下、得られた成果を示す。1.タバコ葉肉細胞のプロトプラストを、調製後一週間目から段階的な濃度のABA存在下で培養したところ、0.3μMから生長阻害が認められ、30μMでほぼ完全に分裂が抑えられた。ABAを与える時期を遅らせると阻害効果が低下することが判明した。得られた結果より、ABA耐性変異株選抜用のABA濃度を100μMに決定した。2.調製後四日目のプロトプラスト(約40,000,000個)を、activation tagging用ヴェクター(pPCVICEn4HPT)を持つアグロバクテリウムと共存培養することにより形質転換後、ABAによる選抜を行った。アガロースに包埋後、約10日でABAを入れないコントロール区では無数のカルスが形成されたのに対し、ABA存在下で2クローンのABA耐性カルスが得られた。得られたカルスは、再分化が容易ではなく、最近になってようやく再分化体が得られつつある。十分な量の葉が得られるのを待ってプロトプラストのABA耐性能の確認を行い、またT-DNA近傍の遺伝子の回収などを行っていく予定である。

The purpose of this study is to analyze the characteristics of acid (ABA), acid, acid and acid (ABA). For example, the effect of ABA, the ability to block division, the ability of ABA to block, and the ability to split, select the target. The following is a demonstration of the results. 1. There is a difference between the temperature and the temperature of the meat cell, the temperature of the next section, the ABA, the growth rate of 0.3 μ m, and the complete division of 30 μ M. The ABA and the time limit do not affect the results. The results are low. The results showed that the ABA tolerant strains were determined by the ABA concentration of 100 μ M. two。 Four days after the election, there are about 40000000 trainees, and the activation tagging is supported by pPCVICEn4HPT. After the election, the ABA elects the bank. About 10 days after the ABA was embedded, there were no significant changes in the number of cells in the area, and the presence of ABA resulted in the loss of ABA tolerance. It is easy to redifferentiate, to redifferentiate, and to redifferentiate recently. Ten percent of the information is required to confirm the ABA tolerance performance, and the T-DNA proximity test is required to determine the accuracy.