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2′, 5′-結合を含むRNAオリゴマーのキャピラリー電気泳動分析法

含有 2,5-键的 RNA 寡聚物的毛细管电泳分析

基本信息

批准号：
08750945
负责人：
川村邦男
金额：
$ 0.64万
依托单位：
Osaka Prefecture University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
财政年份：
1996
资助国家：
日本
起止时间：
1996 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

RNAは遺伝情報と酵素機能の両方を持つため,地球上において最初に遺伝情報を持った物質であると考えられている.本研究ではRNAの化学進化過程を研究するための計測法として,キャピラリー電気泳動法(CE)を用いて,生体内では遺伝情報を保持しない2′, 5′-結合を含むRNAに対する高性能計測法を開発することを目的とし,以下の成果を得た.(1)界面活性剤としてドデシル硫酸ナトリウム(SDS)を用いるミセル導電クロマトグラフィー(MEKC)について,アデノシンヌクレオチドモノマーおよびその2量体の種々の異性体の泳動挙動および分離性能を調べた.その結果,このMEKC法では,2′-, 3′-,および5′-AMPおよび2′, 5′-および3′, 5′-結合を持つアデニルアデノシンモノリン酸(A2′pAおよびA3′pA)を分離する条件は見つからなかった.(2)上記の方法について,ミセルに対するヌクレオチド類の分配を促すため,マグネシウムイオンを添加する方法および第四級アンモニウム塩を添加する方法について検討したが,分離できなかった.また銅イオンと高濃度の尿素を添加する方法(A. S. Cohenら,Anal. Chem. 1987, 59, 1021.))について検討したが,モノマーおよび2量体を分離することはできなかった.(3)シクロデキストリン類を添加する方法について検討した.この方法では,MEKCにおいても,アデノシンものリン酸モノマー類の分離性能は多少向上したが,2量体は全く分離されなかった.(1)および(2)の結果から,ヌクレオチドはミセルに対してほとんど分配しないことが分かったので,ミセルを加えないゾーン電気泳動法について検討した.その結果,2量体を分離できる条件を発見した.

RNA is the first to transmit information and enzyme functions. In this study, the chemical evolution of RNA was studied by using electrokinetic (CE) method, and the information of RNA in vivo was preserved by 2′, 5′-binding. (1)Interfacial active agent (SDS) can be used to adjust the mobility and separation properties of heterosexuals in two species. As a result, MEKC method can be used to separate 2 ′-, 3′-, 5′-AMP from 2′, 5′-AMP and 3′, 5′-AMP from acid (A2′pA and A3′pA). (2)The method mentioned above includes the following steps: (1) promoting the distribution of the first class of products,(2) adding the first class of products to the fourth class of products, and (3) separating the first class of products from the second class of products. The method for adding copper to urea with high concentration (A. S. Cohenら,Anal. Chem. 1987, 59, 1021.)) The two volumes are separated. (3)A method for adding a file to a file is described below. This method is very effective in MEKC, and the separation performance of MEKC is very high. (1)As a result of the above (2), the number of samples collected by the electrokinetic method is increased. As a result, the conditions for the separation of 2 quantities were found.