权益分类	功能权益	普通用户	{{item.name}}会员
{{category.name}}	{{benefitItem.name}}

骨の新陳代謝を担う新規の骨細胞サブセットの同定とその機能解析

负责骨代谢的新型骨细胞亚群的鉴定及其功能分析

基本信息

批准号：
22KJ2172
负责人：
鎗伸弥
金额：
$ 1.47万
依托单位：
Osaka University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for JSPS Fellows
财政年份：
2023
资助国家：
日本
起止时间：
2023-03-08 至 2024-03-31
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22KJ2172/
关键词：
骨代謝骨リモデリング生体骨イメージング破骨細胞骨細胞

项目摘要

骨は、古い骨を溶かす破骨細胞と新しく骨を作る骨芽細胞が協調することで、再構築される(骨リモデリング)。骨リモデリングは破骨細胞が古い骨を溶かすことで始まるが、何がきっかけでいつ始まるのかに関しては不明である。本研究では、二光子励起顕微鏡による生体骨イメージングとsingle cell RNA sequence解析を組み合わせるという、独自の方法論で骨細胞の遺伝子解析をする新たな手法を確立し、骨細胞の機能的な多様性を明らかにする。骨細胞は骨に埋没しており採取することが困難な細胞であるため、骨細胞の多様性が解析可能な細胞数を得られる採取方法を検討する必要があった。従来の採取方法からCollagenaseや脱灰試薬の濃度等を変更することで、多くの骨細胞を採取できる方法を確立した。さらに、骨組織の特定の領域に存在する骨細胞のみを採取する方法の確立を試みた。光刺激により細胞を蛍光標識できるPhotoactivatable(PA)-GFPマウスと生体骨イメージング技術を融合させることで、特定の生体骨組織内に存在する骨細胞のみを蛍光標識することに成功した。加えて、破骨細胞近傍の骨細胞のみを蛍光標識する技術の確立にも取り組んだ。PA-GFPマウスと破骨細胞を蛍光標識したTRAP-tdTomatoマウスを掛け合わせたマウスを作製し、二光子励起イメージング技術を組み合わせることで、破骨細胞近傍の骨細胞のみを蛍光標識できる新たな方法を開発した。

Bone marrow cells, osteoclasts, new bone marrow cells, bone bud cells, bone marrow cells. The bone marrow cells were dissolved in the bone marrow cells, and the bone marrow cells were dissolved in the bone marrow cells. In this study, we established a new method for the analysis of single cell RNA sequence in bone cells by two-photon excitation microscopy, and established a new method for the analysis of single cell RNA sequence in bone cells. Bone cells are difficult to analyze, the diversity of bone cells is possible, and methods are necessary. The method of adopting Collagenase and ash removal agent is established. To establish the method of bone cell culture in specific areas of bone tissue. Photoactivatable(PA)-GFP is a new technology for the identification of bone cells that exist in certain bone tissues. To establish a new technique for identifying osteocytes near osteoclasts. PA-GFP and osteoclast photo-labeling were developed to control and assemble two-photon excitation technology.